[發明專利]一種檢測牛奶中磺胺二甲基嘧啶的比率熒光探針制備方法

在審

• 申請號: 201710968450.3
• 申請日: 2017-10-18
• 公開（公告）號: CN107607510A
• 公開（公告）日: 2018-01-19
• 發明（設計）人: 陳厲;徐葉青;孫琳;鄭佳紅;戴江棟;李春香;閆永勝
• 申請（專利權）人: 江蘇大學
• 主分類號: G01N21/64
• 分類號: G01N21/64
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明屬于食品安全監測檢驗技術領域，涉及一種檢測市售牛奶樣品中潛在磺胺二甲基嘧啶的比率型熒光探針的制備方法。

背景技術

磺胺類藥物作為一種合成抗菌藥物，用于臨床已近半個世紀之久。他的抗菌譜廣、使用簡便、性能穩定，可與抗菌增效劑聯合使用，抗菌作用大大增強。即使在目前大量抗生素問世，磺胺類藥物依然是一種重要的化學治療藥物。磺胺二甲基嘧啶作為磺胺類藥物的一種，被廣泛使用于動物、魚類飼料中，以用于防治葡萄球菌及溶血性鏈球菌等的感染，在治療禽霍亂、禽傷寒、雞球蟲病等疾病中發揮重要的作用。

然而，由于磺胺二甲基嘧啶不規范使用現象的存在，使其在牛肉、魚類、雞蛋和牛奶等動物性食物中的殘留問題顯得日益突出。磺胺二甲基嘧啶是所有磺胺類殘留超標的主要藥物，其殘留在動物體內的消除半衰期較長，在腎中殘留量最高，人類食用含有其過量殘留的動物食品可能導致過敏反應，并有可能對人類疾病治療產生耐藥性突變菌株。同時它也是一種可能的致癌物質，有可能導致甲狀腺癌。因此對其進行環境監控與檢測，尤其針對各種動物性食物的檢測尤其重要。

目前，根據農業部規定，常用的動物性食品中磺胺二甲基嘧啶殘留檢測方法主要以高效液相色譜法等儀器檢測方法為主。這些方法樣品處理復雜，檢測費用昂貴且效率低。實踐生活中對能夠簡單快速檢測食物樣品中磺胺二甲基嘧啶的方法的需求已經迫在眉睫。

發明內容

本發明采用比率型熒光探針的方法對牛奶中磺胺二甲基嘧啶進行檢測，相比較于常見的熒光檢測方法，本方法含兩種不同顏色的熒光發射量子點，被檢測物質濃度微小的濃度變化均可以產生肉眼可分辯的熒光顏色變化，并且對牛奶復雜樣品環境中的雜質離子具有良好的抗干擾能力。

一種檢測牛奶中磺胺二甲基嘧啶的比率熒光探針制備方法，按照下述步驟進行：

(1)碳量子點探針(Carbon dots，下文中簡稱CDs)制備：

適量一水合檸檬酸，聚乙烯亞胺溶于去離子水中，得混合溶液A并將其轉移到聚四氟乙烯高溫高壓反應釜中，磁力攪拌均勻后，放入烘箱中加熱反應。反應完成后，取出于室溫下自然冷卻。完成后將混合溶液A離心分離，取出上清液，即為CDs，備用；

(2)碲化鎘量子點探針(CdTe quantum dots，下文中簡稱CdTe QDs)制備：

適量碲粉，硼氫化鈉和去離子水混合于特制的離心管中，超聲處理后，獲得碲氫化鈉溶液。隨后在氮氣保護下，將適量碲氫化鈉溶液加入到含有巰基乙酸的氮氣預飽和的氯化鎘溶液中，在油浴中回流反應。反應完成后獲得CdTe QDs。

(3)雙發射比率型熒光探針的制備：

將步驟(1)中所得的CDs溶液和CdTe QDs溶液分別用去離子水稀釋到相應倍數，取適量稀釋后的CDs溶液，CdTe QDs溶液和磷酸鹽緩沖溶液混合均勻后，制得雙發射比率型熒光探針。

步驟(1)中，所加入的一水合檸檬酸與聚乙烯亞胺的質量比為2.0：1.0，一水合檸檬酸與去離子水用量為2.0g：35mL。所述磁力攪拌反應的時間為30min，所述烘箱加熱溫度為200℃，時間為5小時。

步驟(2)中，所加入的碲粉和硼氫化鈉的質量之比為51：100，碲粉和去離子水用量為51mg：1.5mL。

步驟(2)中，所述特制的離心管為頂部蓋子戳有小排氣孔的離心管，以釋放反應所產生的氫氣；所述超聲處理時間為1小時。

步驟(2)中，所述氯化鎘，巰基乙酸和碲氫化鈉的摩爾比為1：1.6：0.25。所述回流反應的油浴溫度為100℃，反應時間為1天；所述巰基乙酸的pH值為11.2。

步驟(3)中，所述CDs量子點稀釋倍數為四萬倍，CdTe QDs溶液稀釋倍數為六百倍。

步驟(3)中，所述稀釋后的CDs溶液，CdTe QDs溶液和磷酸鹽緩沖溶液的混合體積比為1.2：2.8：1.0；所述磷酸鹽緩沖溶液的pH值為7.4，濃度為0.1mol/L。

將本發明制備的一種雙發射比率型熒光探針應用于對牛奶中磺胺二甲基嘧啶的檢測，并對牛奶中其他雜志離子具有優秀的抗干擾能力。

本發明的有益效果在于：

(1)本發明所制備的雙發射比率型熒光探針技術具有明顯肉眼可判別的檢測顏色變化，對環境影響能夠內建校正，精確度、敏感度與可視化程度高；

(2)所制的雙發射比率型熒光探針，性能穩定，檢測精確度高；同時具有CDs的優秀光學性能以及CdTe QDs的穩定性；

(3)本發明的制備方法簡單易行、流程較短、操作易控，適于推廣使用。

附圖說明