[發明專利]一種保拉迪酵母菌增菌培養基及其制備方法

有效

• 申請號: 201710964616.4
• 申請日: 2017-10-17
• 公開（公告）號: CN107653196B
• 公開（公告）日: 2021-02-02
• 發明（設計）人: 陳合;雷張騰;姚春旭;洪海平;舒國偉
• 申請（專利權）人: 陜西科技大學
• 主分類號: C12N1/16
• 分類號: C12N1/16;C12R1/85
• 代理公司: 西安智大知識產權代理事務所 61215
• 代理人: 張震國

一種保拉迪酵母菌增菌培養基及其制備方法，以100mL無菌水所含的物質計包括：葡萄糖4?6g，酵母浸粉2?3g，低聚果糖0.2?0.6g，磷酸氫二鈉0.2?0.5g，氯化鈣0.1?0.5g，蛋白胨1?3g，玉米漿2?3g，大豆低聚糖0.2?0.5g，低聚木糖0.3?0.6g，pH值為6.2?6.5。本發明在常用培養基上添加了玉米漿和低聚糖(包括低聚果糖、大豆低聚糖和低聚木糖)，以達到增菌的效果，而且這些成分來源方便，價格低廉，制作簡單，能夠起到明顯的增菌效果。保拉迪酵母菌經活化后，以3％的接種量接入該增菌培養基中，置于37℃、180r/min的5L發酵罐中培養36h，活菌數可達到(6.7?8.9)×10⁸CFU/mL以上，與相同處理的實驗室常用的YPD培養基活菌數(1.8?2.5)×10⁸CFU/mL相比，活菌數得到了提高，增菌效果顯著。

技術領域

本發明屬于益生菌培養技術領域，具體涉及一種保拉迪酵母菌增菌培養基及其制備方法。

背景技術

抗生素的發現曾是人類醫學史上的一個里程碑，但是近年來隨著抗生素的廣泛使用，使得耐藥菌株不斷增加，同時病原菌的抗藥性也有所提高。此外，由于抗生素的廣泛使用，動物腸道菌群的微生態平衡遭到了嚴重破壞，使得腸道菌群失調，進一步導致腸上皮細胞的生理功能和代謝調節水平紊亂，從而使腸道內的致病菌和病原菌因過度繁殖而造成腸道感染。因此，在抗擊腸道感染的過程中，選擇能夠有效防治腸道菌群失調，并且無毒副作用的微生態制劑，將成為研究的熱點。

益生菌是一類對宿主有益的活性微生物，它能夠定植在機體的腸道內，改善宿主腸內菌群的生態平衡。保拉迪酵母菌(Saccharomyces boulardii)是由法國科學家HenriBoulard于1920年從印尼荔枝等水果中分離得到的一種酵母菌類益生菌，它是一種非致病性酵母菌，對人和動物沒有毒副作用，現已作為微生態制劑廣泛用于抗生素和感染引起的腹瀉。保拉迪酵母菌屬于真菌類，而抗生素主要針對細菌類，所以它可以與常用抗生素共用，并且可以調節長期使用抗生素帶來的腸道菌群失衡。保拉迪酵母菌進入人和動物腸道后，可以有效抑制致病菌的生長、提高有益菌的活性、調節腸道的微生態平衡、增強機體的免疫力。

益生元(Prebiotics)是指那些人體不消化或難消化的成分(如低聚糖)，通過選擇性的刺激一種或多種益生菌的生長與活性而對寄主產生有益的影響，從而改善寄主健康的物質。具有益生元功能的物質主要是一些非消化性低聚糖，如低聚異麥芽糖、低聚果糖、低聚半乳糖、低聚木糖、大豆低聚糖、水蘇糖、棉籽糖菊糖、低聚殼聚糖、甘露低聚糖等。低聚木糖又稱木寡糖，是由2-7個木糖分子及β-1,4糖苷鍵結合而成的功能性低聚糖，低聚木糖在促進益生菌增殖的同時會產生多種有機酸，降低腸道pH值，抑制有害菌生長，使有益菌大量增殖。大豆低聚糖是大豆中可溶性糖的總稱，主要成分是水蘇糖、棉籽糖和蔗糖等。大豆低聚糖能促進人體腸道內固有的有益細菌—雙歧桿菌的增長繁殖、改善人體免疫力。

目前國外已經利用保拉迪酵母菌開發了治療腹瀉的制劑，但國內尚未開展系統的研究，僅有少數臨床應用的研究，有關保拉迪酵母菌高密度培養的報道也比較少。王子輝等對保拉迪酵母的培養基成分進行優化，得到優化培養基成分為：10％葡萄糖、0.7％檸檬酸三銨、1.5％玉米漿、0.2％磷酸氫二鉀，在此條件下菌體的生物量比優化前提高了35.5％。胡小媛等利用響應面法優化保拉迪酵母菌的發酵培養基組分，得到最佳發酵培養基為：2％麥芽糖、2％蛋白胨、2.08％酵母浸提物，優化后的菌體濕重比優化前提高了54.1％。為了開發高活性耐貯存保拉迪酵母菌制劑，對其進行高密度培養就顯得至關重要，而選擇價格低廉且能保證保拉迪酵母菌大量生長增殖的培養基，更有利于實現工業化大規模生產。

發明內容

本發明的目的在于提供一種廉價且能保證保拉迪酵母菌大量生長，可應用于高效濃縮型直投式發酵劑的工業化大規模生產的保拉迪酵母菌增菌培養基及其制備方法。