[發明專利]一種羅伊式乳桿菌蛋白酶制備含降壓肽羊乳活性飲料的方法

在審

• 申請號: 201710963846.9
• 申請日: 2017-10-17
• 公開（公告）號: CN108576218A
• 公開（公告）日: 2018-09-28
• 發明（設計）人: 舒國偉;上官文菲;田夢琪;陳合
• 申請（專利權）人: 陜西科技大學
• 主分類號: A23C9/12
• 分類號: A23C9/12;C12N1/20;C12N9/52;C12R1/225
• 代理公司: 西安智大知識產權代理事務所 61215
• 代理人: 張震國

一種羅伊式乳桿菌蛋白酶制備含降壓肽羊乳活性飲料的方法，將羅伊式乳桿菌菌泥中加入磷酸緩沖液，離心得上清液即為胞壁蛋白酶的酶液，冷凍干燥獲得羅伊式乳桿菌胞壁蛋白酶菌粉；向脫脂后鮮羊奶中加入羅伊式乳桿菌胞壁蛋白酶菌粉和CaCl₂酶解，然后再加β?環糊精，拐棗多糖、低聚木糖、赤蘚糖醇、木糖醇、L?蘋果酸，檸檬酸，檸檬酸鈉混合均勻后經均質、殺菌后即得到含降壓肽的羊乳活性飲料。本發明以羊乳為原料，GRAS微生物——羅伊式乳桿菌的胞壁蛋白酶為生物催化劑，將羊乳中的蛋白質水解成具有ACE抑制活性的寡肽，制備的降壓肽羊乳活性飲料可作為輔助降血壓、降血糖和防齲齒食品，具有多重保健功能。

技術領域

本發明涉及一種功能性羊乳飲料的制備方法，特別涉及一種羅伊式乳桿菌蛋白酶制備含降壓肽羊乳活性飲料的方法。

背景技術

陜西省是我國傳統的奶山羊主產區，關中地區是全國最大的奶山羊良種生產基地。2015年底全省奶山羊存欄180萬多只，羊乳產量50萬余噸，羊奶粉市場份額達95％以上，奶山羊數量、羊乳產量及羊奶粉產量均為全國第一，但國內羊乳產品的品種少，主要為羊奶粉及液態羊奶，其中大部分羊奶粉作為工業原料銷往國外，存在產品科技含量低、附加值不高及同質化嚴重等問題，國外羊乳產品種類多，主要包括發酵羊乳產品(如奶酪、脫脂酪乳或酸羊奶)、冷凍產品(如冰激凌或冷凍酸羊奶)、液態奶、黃油、功能性羊奶片等。因此，開發羊乳新產品很有必要。

高血壓是世界最常見的慢性病，是最大的流行病之一，也是心腦血管病最主要的危險因素。常用降壓藥物包括鈣通道阻滯劑、血管緊張素轉換酶抑制劑(ACEI)、血管緊張素受體阻滯劑(ARB)、利尿劑、α受體阻滯劑和β受體阻滯劑六類，其中血管緊張素轉換酶抑制劑(ACEI)對于高血壓患者具有良好的靶器官保護和心血管終點事件預防作用，且降壓作用明確，對糖脂代謝無不良影響，是當今降壓類藥物中發展最快的一種。常用的ACEI類藥物包括卡托普利、依那普利、貝那普利等，但這些合成的ACEI會引起許多不良反應，最常見的是持續性干咳。研究表明，天然來源的ACE抑制肽是蛋白質經酶分解而產生的一類具有ACE抑制活性的多肽類物質，通常含3-10個氨基酸，分子量在300-10000之間，可以快速通過消化粘膜進入血液循環，與ACE強效結合從而抑制其活性，起到降壓的作用，因此又叫降壓肽。部分益生菌的胞壁蛋白酶能水解乳蛋白釋放出肽類，其中的一些短肽具有生物活性，如降血壓，但目前還沒有降血壓的羊乳飲料。

拐棗又叫萬壽果，學名枳椇，其多糖具有降血糖的功能，但目前拐棗多糖制備存在純度低的問題，主要雜質為單糖和雙糖，因此去除單雙糖和保留多糖是制備高純度拐棗多糖的關鍵問題。

發明內容

本發明解決的問題在于提供一種具有降血壓功效的羅伊式乳桿菌蛋白酶制備含降壓肽羊乳活性飲料的方法。

為達到上述目的，本發明采用的技術方案是：

1)羅伊式乳桿菌增菌培養基制備：

將葡萄糖15-25g、酵母浸粉15-25g、硫酸錳0.02-0.05g、吐溫80 0.5-1.0mL，菊糖1.5-2.5g、酪蛋白胨4-6g、磷酸氫二鈉4-6g、亮氨酸15-20mg添加到純凈水中，定容至1L，調節pH值至5.5-7.0，于121℃下滅菌得羅伊式乳桿菌增菌培養基；

2)羅伊式乳桿菌培養及菌體收集：

將羅伊式乳桿菌按2％-5％的接種量接入羅伊式乳桿菌增菌培養基中，35-41℃恒溫培養18-24h，然后離心倒掉上清液，收集菌體沉淀，之后用無菌生理鹽水洗滌后離心得羅伊式乳桿菌菌泥；

3)羅伊式乳桿菌胞壁蛋白酶制備：