[發明專利]一種金桑芪抗毒制劑HPLC指紋圖譜的測定方法及金桑芪抗毒制劑質量控制方法

有效

• 申請號: 201710960264.5
• 申請日: 2017-10-16
• 公開（公告）號: CN107894466B
• 公開（公告）日: 2020-09-04
• 發明（設計）人: 賈忠;劉鴻雁;吳晶;梁劍平
• 申請（專利權）人: 賈忠
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 北京中恒高博知識產權代理有限公司 11249
• 代理人: 陸菊華

1.一種金桑芪抗毒制劑質量控制方法，其特征在于，包括下述步驟：

(1)將10批次金桑芪抗毒制劑分別用95％乙醇-水提取，得到供試品溶液；

(2)精密稱取對照品毛蕊異黃酮葡萄糖苷、蘆丁、甘草苷、金絲桃苷、槲皮素、甘草酸銨適量，用70％乙醇配制成濃度各自為0.01188mg·mL^-1毛蕊異黃酮葡萄糖苷、0.02546mg·mL^-1蘆丁、0.0788mg·mL^-1甘草苷、0.0260mg·mL^-1金絲桃苷、0.01428mg·mL^-1槲皮素、0.0396mg·mL^-1甘草酸銨混合對照品溶液；

(3)按金桑芪抗毒制劑的處方制備分別不含貫葉金絲桃、桑白皮、黃芪、甘草提取物的陰性樣品，按供試品溶液的制備方法制備陰性樣品溶液；

(4)將供試品溶液、混合對照品溶液及陰性樣品溶液分別上高效液相色譜儀檢測得到HPLC指紋圖譜，色譜條件為：色譜柱：Waters XSELECT CSH--C18，4.6mm×150mm、5μm，檢測波長：260nm，流速：1.0mL·min^-1，進樣量：20μL，以乙腈A-0.05～0.2wt％磷酸溶液B為流動相進行梯度洗脫，梯度洗脫時流動相中乙腈的體積比隨時間變化為0-20min，15％漸變43％A；20-38min，43％漸變80％A；38-40min，80％A；

(5)根據檢測得到HPLC指紋圖譜，確認金桑芪抗毒制劑指紋圖譜中24個共有峰，其中1、3、5、8、9、13號峰為貫葉金絲桃提取物中成分，其中3號峰為蘆丁，5號峰為金絲桃苷，13號峰為槲皮素；6、11、16、21、22、23、24號峰為桑白皮提取物中成分；2、7、10、12、18號峰為黃芪提取物中成分，其中2號峰為毛蕊異黃酮葡萄糖苷；4、14、15、17、19號峰為甘草提取物中成分，其中4號峰為甘草苷，19號峰為甘草酸銨；20號峰為貫葉金絲桃和甘草共有峰；

(6)在檢測得到HPLC指紋圖譜中，根據各特征峰的保留時間及峰面積值，繪制標準金桑芪抗毒制劑指紋圖譜；

(7)將待測試金桑芪抗毒制劑抗毒制劑樣品按步驟(1)制備待測樣液，并按步驟(4)的色譜條件測試指紋圖譜，將該指紋圖譜與標準金桑芪指紋圖譜比較，相似度不低于0.95即為合格金桑芪抗毒制劑；

所述金桑芪抗毒制劑由以下中藥材的有效成分組成：貫葉金絲桃7.5-30重量份，桑白皮7.5-30重量份，黃芪5-20重量份，甘草1-5重量份。

2.根據權利要求1所述的質量控制方法，其特征在于，步驟(1)中所述95％乙醇-水的提取液中95％乙醇與水的體積比為(30～70):(70～30)。

3.根據權利要求2所述的質量控制方法，其特征在于，所述95％乙醇與水的體積比為52.6:47.4。

4.根據權利要求1所述的質量控制方法，其特征在于，步驟(4)中所述磷酸溶液的濃度為0.1wt％。