[發(fā)明專(zhuān)利]一種提高硫酸新霉素生產(chǎn)質(zhì)量的方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201710959459.8
• 申請(qǐng)日: 2017-10-16
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN107557413B
• 公開(kāi)（公告）日: 2019-12-17
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 徐珍;劉聰潔;林青
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 河北圣雪大成制藥有限責(zé)任公司
• 主分類(lèi)號(hào): C12P19/52
• 分類(lèi)號(hào): C12P19/52;C12N1/20;C12R1/54
• 代理公司: 13115 石家莊元匯專(zhuān)利代理事務(wù)所(特殊普通合伙)
• 代理人: 李彤曉

1.一種提高硫酸新霉素生產(chǎn)質(zhì)量的方法，包括斜面培養(yǎng)、種子培養(yǎng)和發(fā)酵培養(yǎng)，其特征在于，在發(fā)酵培養(yǎng)的過(guò)程中采用流加或一次性頓補(bǔ)的方式加入酵母粉、半胱氨酸、S-腺苷-L-蛋氨酸、硫酸銨、硫酸亞鐵、硫酸鎂和硫酸錳中的至少一種，流加或一次性頓補(bǔ)時(shí)機(jī)為發(fā)酵100h時(shí)開(kāi)始，流加速率為每升發(fā)酵液流加0.01L/h，一次性頓補(bǔ)用量與流加的總量相同。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種提高硫酸新霉素生產(chǎn)質(zhì)量的方法，其特征在于，在發(fā)酵過(guò)程中流加或一次性頓補(bǔ)如下組分：按g/100mL水計(jì)，包括酵母粉0-20、半胱氨酸0-2、S-腺苷-L-蛋氨酸0-1、硫酸銨0-25、硫酸亞鐵0-0.03、硫酸鎂0-0.01、硫酸錳0-0.01，其中所有組分含量不同時(shí)為0。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種提高硫酸新霉素生產(chǎn)質(zhì)量的方法，其特征在于，包括以下步驟：

A斜面培養(yǎng)：將弗氏鏈霉菌接種至茄瓶斜面培養(yǎng)基內(nèi)，在溫度28±1℃、濕度20-60％的恒溫室培養(yǎng)6-7天，得到成熟的斜面孢子；

B制備孢子液：取步驟A中的孢子斜面在無(wú)菌室內(nèi)每瓶加入30-35個(gè)無(wú)菌玻璃珠，振搖，將孢子打下，然后加入無(wú)菌蒸餾水50-55mL，搖勻，放入已滅菌的空三角瓶中，在2-6℃冰箱中保存?zhèn)溆茫?/p>

C種液的制備：將步驟B制得的斜面孢子懸浮液接入裝有種子培養(yǎng)基的種子罐，接種量按體積比計(jì)為萬(wàn)分之一，然后在35±1℃，罐壓為0.02～0.1Mpa條件下培養(yǎng)40-46h，得到種子液；

D發(fā)酵培養(yǎng)：將步驟C制得的種液接種至裝有發(fā)酵培養(yǎng)基的發(fā)酵罐，接種量10-15％，在35±1℃進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)，罐壓0.02～0.1Mpa，培養(yǎng)至100h開(kāi)始流加或一次性頓補(bǔ)酵母粉和/或半胱氨酸和/或S-腺苷-L-蛋氨酸和/或硫酸銨和/或硫酸亞鐵和/或硫酸鎂和/或硫酸錳，培養(yǎng)至190-200h放罐。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種提高硫酸新霉素生產(chǎn)質(zhì)量的方法，其特征在于，步驟A中，斜面培養(yǎng)基的成分及用量按g/100mL計(jì)，包括葡萄糖0.5、蛋白胨0.2、牛肉膏0.4、氯化鈉0.05、瓊脂2.4。

5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種提高硫酸新霉素生產(chǎn)質(zhì)量的方法，其特征在于，步驟C中，種子培養(yǎng)基的成分及用量按g/100mL計(jì)，包括蛋白胨0.5、黃豆粉1.0、酵母粉2.0、淀粉1.0、葡萄糖3.0、玉米漿1.0、硫酸銨0.1、磷酸二氫鉀0.1、碳酸鈣1.0、豆油0.2。

6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種提高硫酸新霉素生產(chǎn)質(zhì)量的方法，其特征在于，步驟D中，發(fā)酵培養(yǎng)基的成分及用量按g/100mL計(jì)，包括淀粉7.0、淀粉酶0.03、蛋白胨0.4、花生粉2.8、酵母粉0.3、黃豆餅粉0.5、葡萄糖4、氯化鈉0.25、磷酸二氫鉀0.04、硫酸銨0.6、輕質(zhì)碳酸鈣0.4、豆油0.4。