[發明專利]一種L-高絲氨酸的生產菌株及其構建方法和應用

有效

• 申請號: 201710953111.8
• 申請日: 2017-10-13
• 公開（公告）號: CN109666617B
• 公開（公告）日: 2021-02-02
• 發明（設計）人: 謝新開;徐偉
• 申請（專利權）人: 四川利爾生物科技有限公司
• 主分類號: C12N1/21
• 分類號: C12N1/21;C12P13/06;C12R1/19
• 代理公司: 北京永新同創知識產權代理有限公司 11376
• 代理人: 程大軍

1.一種L-高絲氨酸的生產菌株，其特征在于，其具有單一穩定的染色體，不含質粒形式或其他游離DNA載體，在其染色體DNA上thrB基因被敲除；thrL基因被敲除；thrA基因被突變為thrA*，且所述thrA*具有抑制產物的反饋抑制的特性；以及rhtA、thrA*、ppc、pntAB和aspA基因被過表達或增強，其中所述rhtA的過表達或增強通過rhtA23實現；

其中所述thrA*基因以額外的不少于三拷貝的形式整合到染色體DNA上而過表達，且所述ppc、pntAB和aspA基因以額外的三拷貝的形式整合到染色體DNA上而過表達；

其中所述L-高絲氨酸的生產菌株由大腸桿菌種屬構建。

2.一種L-高絲氨酸的生產菌株，其特征在于，其具有單一穩定的染色體，不含質粒形式或其他游離DNA載體，在其染色體DNA上thrB基因被敲除；thrL基因被敲除；thrA基因被突變為thrA*，且所述thrA*具有抑制產物的反饋抑制的特性；以及rhtA、thrA*、ppc、pntAB、aspA、aspC和asd基因被過表達或增強，其中所述rhtA的過表達或增強通過rhtA23實現；

其中所述thrA*基因以額外的不少于三拷貝的形式整合到染色體DNA上而過表達，且所述ppc、pntAB和aspA基因以額外的三拷貝的形式整合到染色體DNA上而過表達，且所述aspC和asd基因以額外的單拷貝的形式整合到染色體DNA上而過表達；

其中所述L-高絲氨酸的生產菌株由大腸桿菌種屬構建。

3.如權利要求1或2所述的L-高絲氨酸的生產菌株，其特征在于，所述菌株為大腸桿菌K-12野生型MG1655。

4.一種權利要求1-3任一項的L-高絲氨酸生產菌株的構建方法，包括任意順序的以下步驟：

A、敲除菌株中的thrB基因；

B、過表達菌株中的rhtA基因；

C、敲除菌株中的thrL基因；

D、突變菌株中的thrA基因為thrA*，所述thrA*具有抑制產物的反饋抑制的特性；

C、在菌株中將thrA*、ppc、pntAB和aspA基因或thrA*、ppc、pntAB、aspA、aspC和asd基因以多拷貝的形式整合到染色體DNA上過表達；

其中所述L-高絲氨酸的生產菌株由大腸桿菌種屬構建。

5.如權利要求4所述的構建方法，其特征在于，所述菌株為大腸桿菌K-12野生型MG1655。

6.如權利要求1-3任一項所述的L-高絲氨酸生產菌株在生產L-高絲氨酸中的應用。