[發明專利]一種用于乙型肝炎病毒檢測的核酸序列及試劑盒

有效

• 申請號: 201710952722.0
• 申請日: 2017-10-13
• 公開（公告）號: CN107604096B
• 公開（公告）日: 2019-09-03
• 發明（設計）人: 任緒義;虞閏六;羅英;宣文靜
• 申請（專利權）人: 杭州迪安醫學檢驗中心有限公司
• 主分類號: C12Q1/70
• 分類號: C12Q1/70;C12Q1/686
• 代理公司: 北京科家知識產權代理事務所(普通合伙) 11427
• 代理人: 陳娟

1.一種用于乙型肝炎病毒檢測的核酸序列，其特征在于，包括用于特異檢測A-I9個基因型的HBV病毒DNA的兩重引物和探針，具體包括如下：

(1)擴增HBV病毒各基因型的引物序列，其核苷酸序列如SEQ ID NO：1～4所示；

(2)擴增HBV病毒各基因型的探針序列，其核苷酸序列如SEQ ID NO：5所示；

(3)擴增人內參基因ERG基因的引物序列，其核苷酸序列如SEQ ID NO：6～7所示；

(4)擴增人內參基因ERG基因的探針序列，其核苷酸序列如SEQ ID NO：8所示；

其中，HBV探針SEQ ID NO：5序列的5’端標記FAM熒光基團，3’端標記MGB淬滅基團，人ERG基因探針SEQ ID NO：8序列的5’端標記VIC熒光基團，3’端標記MGB淬滅基團，

上述8條核酸序列在一次檢測中共同使用。

2.一種用于乙型肝炎病毒檢測的試劑盒，其特征在于，該試劑盒包括如下試劑：

(1)2*supermix：含有DNA聚合酶、Mg2+、PCR反應緩沖液、dATP、dCTP、dTTP和dGTP；

(2)引物探針預混合液：將SEQ ID NO：1～8所示的引物及探針各自用雙蒸水溶解，每條引物的濃度為100μM，每條探針的濃度為10μM；SEQ ID NO：1～8各核酸序列的母液以9:9:9:9:25:9:9:25的比例混合；

(3)陽性對照：含有HBV C基因型質粒和人ERG基因質粒的血清樣本；

(4)陰性對照：含有人ERG基因質粒的血清樣本；

(5)內參質粒：含有人ERG基因質粒濃度為20000拷貝/μL的水溶液。

3.根據權利要求2所述的一種用于乙型肝炎病毒檢測的試劑盒，其特征在于，所述陽性對照中，含HBV C基因型質粒濃度為100拷貝/μL，人ERG基因質粒濃度為100拷貝/μL。

4.根據權利要求2所述的一種用于乙型肝炎病毒檢測的試劑盒，其特征在于，所述陰性對照樣本中，人ERG基因質粒濃度為100拷貝/μL。