[發明專利]一種龜甲膠原多肽的提取方法

有效

• 申請號: 201710951901.2
• 申請日: 2017-10-13
• 公開（公告）號: CN107502639B
• 公開（公告）日: 2021-03-12
• 發明（設計）人: 陸偉
• 申請（專利權）人: 廣東生和堂健康食品股份有限公司
• 主分類號: C12P21/00
• 分類號: C12P21/00;C12R1/125;C12R1/225
• 代理公司: 廣州嘉權專利商標事務所有限公司 44205
• 代理人: 丁佳佳

技術領域

本發明屬于生物分離與純化技術領域，尤其涉及一種龜甲膠原多肽的提取方法。

背景技術

龜甲為龜科動物的背甲及腹甲，富含龜甲膠(膠原蛋白)、氨基酸、脂肪酸、礦物質、多酚類及甾體類物質等多種有效活性成分，具有滋陰潛陽、益腎強骨、養心補血的功效，《神農本草經》將其列為上品，常用于治療陰虛潮熱、骨蒸盜汗、頭暈目眩、筋骨痿軟、心虛健忘等癥狀。

龜甲膠由龜甲熬制而成，是馳名中外的滋補藥品，有極好的滋陰、止血、養血之功效。而龜甲膠原多肽則是由龜甲膠進一步水解制得，比較而言，其分子量更小，具有更好的消化吸收特性及更有效的降血壓、降膽固醇、免疫調節、抗氧化、抗衰老等生理功能。隨著人們對天然營養健康食品需求的增加，龜甲膠原多肽以其良好的生物活性和穩定性越來越受到市場的青睞。

目前制備膠原多肽的方法主要有酸法、堿法、熱解法和酶解法四大類，其中酸法提取能較好地保持膠原多肽的結構完整性，但品質不高；堿法提取易造成膠原多肽的三螺旋結構解體，且對設備材質要求較高；熱解法雖操作簡單，但水解時間較長，往往需要帶壓操作；酶解法成本偏高，產品具有較大的苦腥味，同時色澤暗黃、溶解性不好。

發明內容

針對現有技術存在的問題，本發明的目的是提供一種利用微生物發酵法提取龜甲膠原多肽的方法，不僅操作簡單、成本低廉，還能利用微生物的復雜生化過程達到一定的脫苦脫腥效果。

為了實現上述目的，本發明采用以下技術方案：

一種龜甲膠原多肽的提取方法，包括以下步驟：

(1)預處理：取龜甲清洗干凈，進行蒸煮脫脂處理，干燥，粉碎，得到龜甲粉；所述蒸煮脫脂處理包括將龜甲置于水中進行蒸煮或將龜甲在隔水的情況下進行蒸煮；

(2)發酵：按料液質量比為1:25-1:30的比例向步驟(1)制得的龜甲粉中加水配成龜甲粉溶液，然后添加2.0％-3.0％的葡萄糖，調節溶液的pH，再接種2.5％-3.5％的復合菌進行發酵培養；發酵完成后進行滅菌處理，得到發酵液；

(3)離心：將步驟(2)制得的發酵液進行離心處理，取上清液即為龜甲膠原多肽粗提液；

(4)干燥：對步驟(3)得到的龜甲膠原多肽粗提液進行真空冷凍干燥，得到龜甲膠原多肽制品。

優選地，所述步驟(1)中，蒸煮脫脂處理的溫度為110-130℃，壓力為0.1-0.3MPa，時間為30-50min。

優選地，所述步驟(1)中，干燥的溫度為60-80℃，時間為50-70min。

優選地，所述步驟(2)中，pH調節為6.0-7.0。

優選地，所述步驟(1)中，粉碎后過100目篩。

優選地，所述步驟(2)中，所述復合菌為枯草芽孢桿菌和保加利亞乳桿菌按質量比為1-5:1-5復配得到。

進一步優選地，所述步驟(2)中，所述復合菌為枯草芽孢桿菌和保加利亞乳桿菌按質量比為1:1復配得到。

優選地，所述步驟(2)中，發酵培養方式為：在35-45℃，130-140r/min的條件下搖床培養45-50h。

優選地，所述步驟(2)中，滅菌處理的溫度為110-130℃，時間20-40min。

優選地，所述步驟(3)中，離心處理的時間為5-15min，轉速為4000-6000r/min。

優選地，所述步驟(4)中真空冷凍干燥的溫度為55-65℃，時間為4-6小時，真空度為93.3-98.6KPa。

本發明的有益效果：

與現有技術相比，本發明具有如下優點：

(1)本發明對粉碎前的龜甲在高溫高壓下進行蒸煮脫脂處理，不僅脫脂率高，減小了后續超微粉碎的壓力，還能有效增強龜甲膠原蛋白與水分子的相互作用，提高蛋白的溶出率；

(2)采用復合菌(枯草芽孢桿菌和保加利亞乳桿菌的復合物)發酵，可以明顯改善多肽的品質和口感，其中枯草芽孢桿菌能產多種蛋白酶且活性較強，大大提高了龜甲膠原多肽的產率；保加利亞乳桿菌作用于蔗糖產乳酸，使產物具有特殊香味，其苦味肽含量極低，多肽含量豐富且溶解性高，易被人體消化。

具體實施方式

下面結合具體實施例對本發明進行詳細的說明。

實施例1

一種龜甲膠原多肽的提取方法，包括以下步驟：

(1)預處理：取龜甲清洗干凈，在溫度為121℃，壓力為0.2MPa下進行蒸煮脫脂處理40min，然后置于溫度為70℃的干燥箱內干燥1h，而后經粉碎機粉碎后過100目篩，得到龜甲粉；