[發明專利]一種生物樣品中有機酸的檢測方法

在審

• 申請號: 201710949280.4
• 申請日: 2017-10-12
• 公開（公告）號: CN107607666A
• 公開（公告）日: 2018-01-19
• 發明（設計）人: 馬振菁;林綏;闕慧卿;龍瑞斌;強小冰;陳姝彥;錢麗萍
• 申請（專利權）人: 福建省醫學科學研究院
• 主分類號: G01N30/88
• 分類號: G01N30/88;G01N30/06
• 代理公司: 福州元創專利商標代理有限公司35100
• 代理人: 蔡學俊

1.一種生物樣品中有機酸的檢測方法，其特征在于：包括以下步驟：

1）將晨尿或空腹血液于2200g離心8min，取上清液備用；

2）取步驟1）所得上清液1mL于離心管中，加入100μL內標物，搖勻，再加入100μL質量濃度為2.5%的鹽酸羥胺和300μL、10mol/L的氫氧化鈉溶液，蓋緊，充分混勻后靜置1h，再加入130μL質量濃度為50%的硫酸酸化，最后加入2mL質量濃度為10%的硫酸甲醇溶液，漩渦振蕩1min后于60℃水浴鍋中甲酯化反應90min；

3）反應結束后將其取出，放至室溫，然后加入1mL超純水混勻，再加入2mL氯仿，漩渦振蕩2min后于2200g離心8min，取下層溶液；

4）將所得下層溶液經0.45μm微孔有機濾膜過濾后，采用GC-MS進行檢測。

2.根據權利要求1所述生物樣品中有機酸的檢測方法，其特征在于：步驟2）中所述內標物為十七烷酸。

3. 根據權利要求1所述生物樣品中有機酸的檢測方法，其特征在于：GC-MS檢測時的色譜條件為：Hp-5ms色譜柱，30 m×0.25 mm，0.25 μm；進樣量：1μL；升溫程序：初始40℃保持3min，然后以8℃/min升溫至290℃，保持3min；以氦氣為載氣；流速為1.0mL/min；進樣口溫度：260℃，傳輸線：290℃；采用電子轟擊離子源質譜檢測，其電子能量70 eV；離子源溫度230℃；掃描范圍：m/z 50-550，掃描方式：全掃描和選擇離子掃描，溶劑延遲3.0min。