[發明專利]一種測定外源dsRNA對瓢蟲毒性影響的方法有效
| 申請號： | 201710949193.9 | 申請日： | 2017-10-12 |
| 公開（公告）號： | CN107858405B | 公開（公告）日： | 2021-09-24 |
| 發明（設計）人： | 潘慧鵬;楊春曉;邱寶利;吳建輝;桑文;王興民;金豐良 | 申請（專利權）人： | 華南農業大學 |
| 主分類號： | C12Q1/6851 | 分類號： | C12Q1/6851 |
| 代理公司： | 廣州粵高專利商標代理有限公司 44102 | 代理人： | 林麗明 |
| 地址： | 510642 廣*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 測定 dsrna 瓢蟲 毒性 影響 方法 | ||
【權利要求書】：
1.一種測定外源dsRNA對瓢蟲毒性影響的方法，其特征在于，所述瓢蟲為異色瓢蟲、七星瓢蟲和/或十二星瓢蟲；把外源dsRNA均勻混入蔗糖溶液后飼喂剛剛孵化1天的瓢蟲幼蟲2天后，再用豌豆蚜飼喂，此為處理組；同時以混有砷酸鉀的蔗糖溶液為陽性對照，并以混入來源于植物的β-glucuronidase基因dsRNA的蔗糖溶液為陰性對照；在開始飼喂dsRNA后的3、5、7、9天分別取瓢蟲樣本，應用RT-qPCR進行目標基因v-ATPase A表達量變化的分析；通過比較處理組和對照組瓢蟲中目標基因表達量的變化，并觀察統計瓢蟲的存活率和發育歷期，用以評價dsRNA的潛在毒性。
2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述蔗糖溶液的終濃度為10～15％。
3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，所述陽性對照中砷酸鉀的濃度為50～100ng/μl。
4.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，測定在23℃，50％的RH，光照14L：10D的培養箱中進行。
5.權利要求1～4任一所述方法在評價外源dsRNA對瓢蟲毒性影響方面的應用。
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