[發(fā)明專(zhuān)利]一種血紅素提取方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201710948474.2
• 申請(qǐng)日: 2017-10-12
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN107619411B
• 公開(kāi)（公告）日: 2020-05-22
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 鄧飛
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 湖南省希母生物科技有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): C07D487/22
• 分類(lèi)號(hào): C07D487/22
• 代理公司: 北京風(fēng)雅頌專(zhuān)利代理有限公司 11403
• 代理人: 馬驍;于潔

本發(fā)明公開(kāi)了一種血紅素提取方法，包括步驟：(1)將抗凝豬血離心后，收集紅血球液，將紅血球液與水混合后，攪拌溶血，然后調(diào)節(jié)pH值至7～9，加入復(fù)合蛋白水解酶進(jìn)行酶解；(2)調(diào)節(jié)酶解后的酶解液pH值至3～3.5，靜置后收集第一沉淀物；(3)將第一沉淀物溶于氫氧化鈉溶液中并調(diào)節(jié)pH值至7～9，離心取上清液，上清液中加入無(wú)水氯化鈣沉淀血紅素，離心收集第二沉淀物；(4)將第二沉淀物洗滌至中性，收集第三沉淀物；(5)將第三沉淀物烘干，即得。采用本發(fā)明方法制備得到的血紅素產(chǎn)量高，純度高，而且本發(fā)明的血紅素提取方法成本低廉，制備效率高，安全環(huán)保，生產(chǎn)工藝簡(jiǎn)單可控，具有較好的經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效益，市場(chǎng)前景十分樂(lè)觀。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及血紅素制備技術(shù)領(lǐng)域，特別是指一種血紅素提取方法。

背景技術(shù)

血紅素(heme)又稱鐵卟啉，由原卟啉Ⅸ與一個(gè)鐵離子絡(luò)合而成，廣泛存在于動(dòng)物的血液、肌肉和某些植物組織中，是血紅蛋白、肌紅蛋白、細(xì)胞色素C、過(guò)氧化氫酶和過(guò)氧化物酶等的輔基。血紅素在血液中主要存在于紅細(xì)胞內(nèi)，一分子珠蛋白與四分子血紅素以非共價(jià)鍵結(jié)合。血紅素具有重要的生理功能和很高的應(yīng)用價(jià)值，在醫(yī)藥、食品、化工、保健品行業(yè)中有廣泛應(yīng)用。在臨床上，血紅素是目前治療缺鐵性貧血的一種療效較好的補(bǔ)鐵劑，與常用的硫酸亞鐵、富馬酸鐵、葡萄糖酸亞鐵等化學(xué)補(bǔ)鐵劑比較，具有生物利用度高、無(wú)體內(nèi)鐵蓄積中毒及胃腸刺激等優(yōu)點(diǎn)；血紅素與EDTA配合還可用于治療鉛中毒。在制藥工業(yè)中，血紅素是制備用于治療惡性腫瘤的血卟啉類(lèi)藥物和治療急、慢性遷延性、慢性活動(dòng)性肝炎的原卟啉鈉的原料。在食品行業(yè)，血紅素是一種天然色素，可替代熟肉制品中危及人體健康的發(fā)色劑亞硝酸鹽及人工合成色素，減少亞硝酸鹽的致癌作用，并能保持肌肉固有的天然色澤。血紅素作為一種高效鐵源物質(zhì)，已在飼料生產(chǎn)中開(kāi)始應(yīng)用，成為一種新型綠色飼料添加劑。在分析化學(xué)上，血紅素可用來(lái)鑒定銅。

此外，我國(guó)每年豬血總量約有150萬(wàn)噸，除極少量用于制作血豆腐或飼料外，大部分被廢棄，造成資源浪費(fèi)和環(huán)境污染。可見(jiàn)，綜合開(kāi)發(fā)利用豬血資源提取血紅素，既可以減少環(huán)境污染，又可以增加豬血的經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效益，具有很高的應(yīng)用價(jià)值和較好的市場(chǎng)前景。所以，研究血紅素的提取技術(shù)意義重大。

目前國(guó)內(nèi)血紅素的研究比較熱門(mén)，但生產(chǎn)上分離提取仍未突破傳統(tǒng)的方法，依然采用的是酸性丙酮沉淀法。此方法先用氯仿沉淀豬血球中的血紅蛋白，然后過(guò)濾收集沉淀，加入5倍體積2.5％的濃鹽酸丙酮溶液，攪拌浸提，收集丙酮血紅素溶液，最后真空抽濾回收丙酮，獲得血紅素純品。這種傳統(tǒng)方法的缺點(diǎn)是工藝復(fù)雜，使用大量有機(jī)溶劑，不安全環(huán)保，得到的血紅素油性大，需要蒸餾塔等大型設(shè)備，設(shè)備投入很大，產(chǎn)品純度低，產(chǎn)品成本高，應(yīng)用受到限制。

發(fā)明內(nèi)容

有鑒于此，本發(fā)明的目的在于提出一種血紅素提取方法，該提取方法采用酶解法從抗凝豬血中提取血紅素，避免了傳統(tǒng)有機(jī)溶劑帶來(lái)的化學(xué)污染，安全環(huán)保，生產(chǎn)工藝簡(jiǎn)單可控，血紅素產(chǎn)品產(chǎn)量高，純度可達(dá)96.8％以上。

基于上述目的，本發(fā)明提供的一種血紅素提取方法，包括以下步驟：

(1)將抗凝豬血離心后，收集紅血球液，將紅血球液與水混合后，攪拌溶血，然后調(diào)節(jié)pH值至7～9，加入復(fù)合蛋白水解酶進(jìn)行酶解；

(2)調(diào)節(jié)酶解后的酶解液pH值至3～3.5，靜置后收集第一沉淀物；

(3)將第一沉淀物溶于氫氧化鈉溶液中并調(diào)節(jié)pH值至7～9，離心取上清液，上清液中加入無(wú)水氯化鈣沉淀血紅素，離心收集第二沉淀物；

(4)將第二沉淀物洗滌至中性，收集第三沉淀物；

(5)將第三沉淀物烘干，即得血紅素。