[發明專利]一種血紅素提取方法有效
| 申請號: | 201710948474.2 | 申請日: | 2017-10-12 |
| 公開(公告)號: | CN107619411B | 公開(公告)日: | 2020-05-22 |
| 發明(設計)人: | 鄧飛 | 申請(專利權)人: | 湖南省希母生物科技有限公司 |
| 主分類號: | C07D487/22 | 分類號: | C07D487/22 |
| 代理公司: | 北京風雅頌專利代理有限公司 11403 | 代理人: | 馬驍;于潔 |
| 地址: | 415115 湖南*** | 國省代碼: | 湖南;43 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 血紅素 提取 方法 | ||
1.一種血紅素提取方法,其特征在于,包括以下步驟:
(1)將抗凝豬血離心后,收集紅血球液,將紅血球液與水混合后,攪拌溶血,然后調節pH值至7~9,加入復合蛋白水解酶進行酶解;所述復合蛋白水解酶為木瓜蛋白酶、堿性蛋白酶和胰蛋白酶的混合物;所述紅血球液與水的質量比為1:1.5~2.5,攪拌溶血的時間為20~40min,所述木瓜蛋白酶、堿性蛋白酶和胰蛋白酶的質量比為4:4:2,且所述復合蛋白水解酶的加入量為紅血球液質量的3‰~5‰;所述酶解的溫度為55~58℃,所述酶解的時間為4~6h;
(2)調節酶解后的酶解液pH值至3~3.5,靜置后收集第一沉淀物;
(3)將第一沉淀物溶于氫氧化鈉溶液中并調節pH值至7~9,離心取上清液,上清液中加入無水氯化鈣沉淀血紅素,離心收集第二沉淀物;
(4)將第二沉淀物洗滌至中性,收集第三沉淀物;
(5)將第三沉淀物烘干,即得血紅素;
其中,將第二沉淀物洗滌至中性具體分為以下步驟:
a.將第二沉淀物溶于乙二胺四乙酸二鈉溶液中洗滌;
b.然后用硝酸溶液進行洗滌;
c.最后用雙蒸水洗滌至中性。
2.根據權利要求1所述的血紅素提取方法,其特征在于,步驟(2)中所述靜置的時間為0.5~1.5h。
3.根據權利要求1所述的血紅素提取方法,其特征在于,步驟(3)中所述氫氧化鈉溶液與所述第一沉淀物的質量比為4~6:1,所述無水氯化鈣的加入量為第一沉淀物質量的0.2%~0.3%。
4.根據權利要求1所述的血紅素提取方法,其特征在于,步驟a中所述乙二胺四乙酸二鈉溶液的質量分數為0.05%~0.15%,所述乙二胺四乙酸二鈉溶液與所述第二沉淀物的質量比為3~5:1。
5.根據權利要求1所述的血紅素提取方法,其特征在于,步驟b中所述硝酸溶液的pH值為1.8~2.2。
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