[發(fā)明專利]一種用于鑒定西瓜果實形狀的插入缺失標記位點、引物及應(yīng)用有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201710943458.4 | 申請日： | 2017-10-11 |
| 公開（公告）號： | CN107619875B | 公開（公告）日： | 2021-05-28 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 劉文革;趙勝杰;路緒強;何楠;豆峻嶺 | 申請（專利權(quán)）人： | 中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院鄭州果樹研究所 |
| 主分類號： | C12Q1/6895 | 分類號： | C12Q1/6895;C12N15/11 |
| 代理公司： | 北京輕創(chuàng)知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11212 | 代理人： | 楊立;陳璐 |
| 地址： | 450000 河南省鄭*** | 國省代碼： | 河南;41 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 用于 鑒定 西瓜 果實 形狀 插入 缺失 標記 引物 應(yīng)用 | ||
1.一種用于鑒定西瓜果實形狀的PCR擴增引物對，其特征在于，所述引物對中的上游引物是根據(jù)西瓜基因組97103的第3號染色體的第26847023位核苷酸及其上游序列進行設(shè)計，所述引物對中的下游引物是根據(jù)西瓜基因組97103的第3號染色體的第26847181位核苷酸的下游序列進行設(shè)計，所述引物對由如SEQ.ID.NO.2和SEQ.ID.NO.3所示的兩條單鏈DNA組成。
2.一種鑒定西瓜果實形狀的方法，其特征在于，包括如下步驟：
(1)提取西瓜組織的DNA；
(2)PCR擴增：利用權(quán)利要求1所述的PCR擴增引物對，對待測樣品進行PCR擴增；
(3)對PCR擴增產(chǎn)物進行凝膠電泳檢測，在525bp有條帶，即為長形西瓜；在684bp有條帶，即為圓形西瓜。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種鑒定西瓜果實形狀的方法，其特征在于，步驟(2)所述PCR擴增的反應(yīng)體系為：DNA 2μL、2×PCR Mix 12.5μL、上游引物1.25μL、下游引物1.25μL、滅菌蒸餾水8μL，總體積25μL。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種鑒定西瓜果實形狀的方法，其特征在于，步驟(2)所述PCR擴增的條件為：95℃、5min；94℃、30s,57℃、30s,72℃、50s,共35個循環(huán)；72℃、10min；4℃保存。
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