[發明專利]一種測定金霉素預混劑含量及相關物質的方法

在審

• 申請號: 201710938501.8
• 申請日: 2017-09-30
• 公開（公告）號: CN107727766A
• 公開（公告）日: 2018-02-23
• 發明（設計）人: 謝昌賢;秦定宇;金玲玲;楊曉亞;劉運添;云喜報;王鵬飛
• 申請（專利權）人: 金河生物科技股份有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 北京同恒源知識產權代理有限公司11275
• 代理人: 趙榮之

1.一種測定金霉素預混劑含量及相關物質的方法，其特征在于，所述方法為高效液相色譜法，色譜條件為：

色譜柱：C18；

柱溫：45℃；

檢測波長：280nm；

流動相：以體積比為220:80:100的水、磷酸溶液和N,N-二甲基甲酰胺的混合溶液為流動相，所述磷酸溶液的濃度為2mol/L；

泵流量：0.4mL/min；

進樣體積：4μL；

運行時間：5min。

2.根據權利要求1所述的一種測定金霉素預混劑含量及相關物質的方法，其特征在于，所述相關物質為四環素，差向四環素，差向金霉素，去甲基金霉素，2-乙酰-2-去甲酰胺基四環素和2-乙酰-2-去甲酰胺基金霉素。

3.根據權利要求1或2所述的一種測定金霉素預混劑含量及相關物質的方法，其特征在于，所述高效液相色譜法具體包括如下步驟：

(1)配置金霉素標準儲備溶液：取金霉素標準品用0.01mol/L HCl稀釋配制成金霉素標準儲備溶液，備用；

(2)配置金霉素工作標準品溶液：以步驟(1)中金霉素標準儲備溶液為母液用0.01mol/L HCl稀釋配制成濃度為200μg/mL的金霉素工作標準品溶液，過0.22μm濾膜，備用；

(3)配置金霉素供試品溶液：取金霉素預混劑樣品用0.01mol/L HCl稀釋配制成金霉素供試品溶液，過0.22μm濾膜，備用；

(4)利用高效液相色譜儀測試：取相同體積的金霉素工作標準品溶液和金霉素供試品溶液，注入高效液相色譜儀，按照權利要求1或2所述的色譜條件進行高效液相色譜分析；

利用峰面積外標法，各相關物質含量采用主成分自身對照法進行計算，計算公式如下：

A_供：為金霉素供試品溶液圖譜中相應組分的峰面積；

A_工：為金霉素工作標準品溶液圖譜中金霉素的峰面積；

m_標：為金霉素標準儲備溶液中金霉素標準品的質量；

m_供：為金霉素供試品溶液中金霉素預混劑樣品的質量；

N％：為金霉素標準儲備溶液中金霉素的質量體積百分比。

4.根據權利要求3所述的一種測定金霉素預混劑含量及相關物質的方法，其特征在于，步驟(3)中，所述金霉素供試品溶液中金霉素濃度為160-240μg/mL。