[發明專利]木聚糖酶基因、重組表達載體、重組表達菌株、木聚糖酶及其制備方法、及飼料的制備方法有效
| 申請號： | 201710934710.5 | 申請日： | 2017-09-30 |
| 公開（公告）號： | CN107699584B | 公開（公告）日： | 2020-10-23 |
| 發明（設計）人： | 楊江科;馬騰飛 | 申請（專利權）人： | 武漢輕工大學 |
| 主分類號： | C12N15/56 | 分類號： | C12N15/56;C12N9/24;C12N15/81;C12N15/66;C12N1/19;A23K20/189;A23K10/14;C12R1/84 |
| 代理公司： | 深圳市世紀恒程知識產權代理事務所 44287 | 代理人： | 胡海國 |
| 地址： | 430023 湖北省武*** | 國省代碼： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 聚糖 基因 重組 表達 載體 菌株 及其 制備 方法 飼料 | ||
1.一種木聚糖酶基因Xynsyn2，用于編碼木聚糖酶，其特征在于，所述木聚糖酶基因Xynsyn2的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示，所述木聚糖酶基因Xynsyn2編碼出的木聚糖酶的氨基酸序列如SEQ ID NO：2所示。
2.一種重組表達載體，其特征在于，包括如權利要求1所述的木聚糖酶基因Xynsyn2。
3.如權利要求2所述的重組表達載體，其特征在于，所述木聚糖酶基因Xynsyn2的拷貝數為多個。
4.一種重組表達菌株，其特征在于，包括如權利要求1所述的木聚糖酶基因Xynsyn2。
5.如權利要求4所述的重組表達菌株，其特征在于，所述重組表達菌株的宿主細胞為畢赤酵母。
6.一種如權利要求2至3任意一項所述的重組表達載體的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：
將合成的木聚糖酶基因Xynsyn2通過酶切位點EcoRⅠ連接到中間載體pUC57，獲得pUC-Xynsyn2載體；
將pUC-Xynsyn2載體和pAO815載體分別用EcoRⅠ酶切，電泳、膠回收木聚糖酶基因Xynsyn2片段和pAO815片段；
將木聚糖酶基因Xynsyn2片段和pAO815片段通過T4 DNA連接酶連接，獲得pAO815-Xynsyn2重組表達載體。
7.一種如權利要求4至5任意一項所述的重組表達菌株的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：
將合成的木聚糖酶基因Xynsyn2通過酶切位點EcoRⅠ連接到中間載體pUC57，獲得pUC-Xynsyn2載體；
將pUC-Xynsyn2載體和pAO815載體分別用EcoRⅠ酶切，電泳、膠回收木聚糖酶基因Xynsyn2片段和pAO815片段；
將木聚糖酶基因Xynsyn2片段和pAO815片段通過T4 DNA連接酶連接，獲得pAO815-Xynsyn2重組表達載體；
將pAO815-Xynsyn2重組表達載體導入畢赤酵母宿主細胞中，獲得重組表達菌株。
8.一種由如權利要求1所述的木聚糖酶基因Xynsyn2所編碼的木聚糖酶的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：
將合成的木聚糖酶基因Xynsyn2通過酶切位點EcoRⅠ連接到中間載體pUC57，獲得pUC-Xynsyn2載體；
將pUC-Xynsyn2載體和pAO815載體分別用EcoRⅠ酶切，電泳、膠回收木聚糖酶基因Xynsyn2片段和pAO815片段；
將木聚糖酶基因Xynsyn2片段和pAO815片段通過T4 DNA連接酶連接，獲得pAO815-Xynsyn2重組表達載體；
將pAO815-Xynsyn2重組表達載體導入畢赤酵母宿主細胞中，獲得重組表達菌株；
培養重組表達菌株，從培養物中獲得木聚糖酶。
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