[發明專利]人NOS3基因第74位點的單核苷酸多態性及其應用

在審

• 申請號: 201710931723.7
• 申請日: 2017-10-09
• 公開（公告）號: CN107475437A
• 公開（公告）日: 2017-12-15
• 發明（設計）人: 王思捷
• 申請（專利權）人: 王思捷
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;C12N15/11
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.人NOS3基因第74位點的單核苷酸多態性，其特征在于所述第74位點的單核苷酸多態性是指該位點在人群中為C核苷酸或A核苷酸，其中健康人群該位點均為C核苷酸，21%的類風濕關節炎患者人群該位點為A核苷酸；NOS3基因第74位點為A核苷酸是類風濕關節炎的易感基因位點核苷酸，其所在片段對應的序列如SEQ ID NO.1所示。

2.根據權利要求1所述的人NOS3基因第74位點的單核苷酸多態性，其特征在于所述第74位點的單核苷酸多態性在制備人類風濕關節炎診斷芯片、構建人類風濕關節炎檢測方法、研發人類風濕關節炎治療藥物中的應用。

3.人NOS3基因第74位點的單核苷酸多態性檢測試劑盒，其特征在于所述檢測試劑盒為實時熒光定量PCR試劑盒，包含特異性設計的上下游引物和兩種TaqMan探針，其中上下游引物P1和P2序列分別如SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示；兩種TaqMan探針T1和T2序列如SEQ ID NO.5和SEQ ID NO.6所示，分別對應NOS3基因第74位點的C和A核苷酸,其中T1探針其5’端標記FAM熒光基團，而T2探針其5’端標記HEX熒光基團，此兩種探針3’端均標記TAMRA熒光淬滅基團；所述試劑盒可以用于檢測人NOS3基因第74位點的C核苷酸或A核苷酸中的至少一個。

4.根據權利要求3所述的人NOS3基因第74位點的單核苷酸多態性檢測試劑盒，對應有人NOS3基因第74位點的單核苷酸多態性檢測方法，其特征在于所述檢測方法為實時熒光定量PCR檢測法，實時熒光定量PCR體系為：2×定量PCR預混液10.0μL，上下游引物P1和P2的終濃度均為1μmol/L，TaqMan探針T1和T2終濃度均為1.5μmol/L，基因組DNA終濃度不少于10ng/μL，滅菌蒸餾水補足至反應總體積為20μL；實時熒光定量PCR檢測條件為：95℃預變性3min，再95℃變性15s，57℃退火及延伸40s，循環50次。