[發明專利]40到50度酒酒精度簡便快速測定方法

在審

• 申請號: 201710925051.9
• 申請日: 2017-10-02
• 公開（公告）號: CN107655843A
• 公開（公告）日: 2018-02-02
• 發明（設計）人: 黃種山;黃海霞
• 申請（專利權）人: 黃種山
• 主分類號: G01N21/33
• 分類號: G01N21/33;G01N1/38
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及乙醇檢測方法，特別涉及一種40到50度酒的乙醇含量即酒精度的簡便快速測定方法。

背景技術

乙醇是酒的主要成分，其含量是酒品質的重要指標之一，國標中稱之為酒精度，通常它是指在 20 ℃下，每 100 ml 酒液中含有的乙醇毫升數。酒精度是酒類產品的必測指標，目前測定方法有很多，常見的包括酒精度計法、密度瓶法、氣相色譜法和近紅外光譜法等。氣相色譜法和近紅外光譜法這兩種是基于現代分析技術的方法，具有檢測靈敏度高、結果精確、可以高通量測定等優點，但是也存在設備昂貴、操作復雜和檢測成本高等不足，因此不適合酒廠檢測實際。酒廠中最常用的是酒精度計法和密度瓶法，然而這兩種方法檢測前均需對飲料酒預先蒸餾，除去雜質后，再對酒精水溶液進行測定。整個檢測過程耗時長、步驟多、穩定性差，不能滿足快速檢測發展的需求。

綜上可知，目前亟需建立準確可靠、簡便快速且經濟實用的酒精度測定方法，針對40到50度酒本發明提供了基于特定超短DNA片段（即寡聚脫氧核苷酸鏈）在不同酒精度酒樣中變性程度不同導致260nm波長下吸光度有所差異，而建立了一種新的酒精度測定方法即滿足此需求。DNA雙鏈是靠堿基之間的氫鍵和堆積力維持的，然而在一些外在因素如高溫、極端pH、有機試劑如尿素、甲酰胺、甲醇和乙醇存在時，這些維持力會遭到破壞，從而使得DNA雙鏈解鏈變成單鏈，導致其在260nm下的吸光度大幅增加（又稱增色效應）。利用這一特性，構建合適的DNA體系，將酒樣加入其中處理，利用該DNA體系吸光度同酒樣中酒精度之間的關聯，從而實現酒精度的測定。

發明內容

本發明的目的在于提供40到50度酒酒精度的簡便快速測定方法。

本發明解決其技術問題所采用的技術方案為，40到50度酒酒精度簡便快速測定方法的主要步驟如下：

（1）移取400ul室溫待測40到50度酒酒樣到空的酶標板中，加入50ul初始變性劑和50ul短雙鏈DNA片段混合體系并充分混勻后靜置5min，同時設置對照孔為400ul待測酒樣加50ul初始變性劑加50ul蒸餾水，待測酒樣和對照均取平行測三次，樣本處理好后將酶標板置于酶標儀中。

（2）設定好酶標儀程序在260nm波長下測定樣品孔和對照孔中的吸光度，則樣品的平均吸光度減去對照的平均吸光度即為樣品中短雙鏈DNA片段混合體系的實際吸光度。將樣品中DNA體系的實際吸光度x代入關系式y=9.1096x+38.38（40≤y≤50）中換算出酒樣的酒精度y。

其中，步驟（1）中所述的40到50度酒是指酒精度大于等于1且小于等于20的酒水類產品；所述酒樣溫度為正常室溫即可，優選地，控制在30.0±5.0℃之間；所述的初始變性劑是10%質量體積分數的尿素和12%體積體積分數的甲酰胺混合水溶液，即每100ml混合水溶液中含有10g尿素和12ml甲酰胺；所述的短雙鏈DNA片段混合體系包括了2條短雙鏈DNA片段1和2，其序列分別如SEQ ID NO：1-2所示，各條短雙鏈DNA片段濃度均為10μmol/l。

本發明篩選到合適的短雙鏈DNA片段混合體系，并揭示了其在40到50度酒中吸光度和酒精度之間的關系，在此基礎上構建了40到50度酒酒精度的簡便快速測定方法。本發明的酒精度測定方法適用于40到50度酒的測定，具有良好的準確性和可靠性，無需蒸餾比較安全，操作簡便迅速，所需酒樣量很少，且價格低廉，適合于酒廠40到50度酒酒精度測定實踐。

附圖說明

圖1是本發明40到50度酒酒精度測定新方法的吸光度-酒精度標準曲線。橫坐標是加短雙鏈DNA片段混合體系和初始變性劑處理的人工酒樣在260nm下的吸光度，縱坐標是其酒精度。圖中的y=9.1096x+38.38是SPSS 23.0軟件擬合的吸光度x和酒精度y的關系式，R²=0.9992表示的是擬合曲線的決定系數。

具體實施方式

以下結合具體實施例，進一步闡述本發明。