[發(fā)明專利]淫羊藿提取物中16種化學(xué)成分含量的測定方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201710919692.3
• 申請(qǐng)日: 2017-09-30
• 公開（公告）號(hào): CN107655994B
• 公開（公告）日: 2020-07-03
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 何俊;孫夢潔;歐陽慧子;常艷旭;高秀梅
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 天津中醫(yī)藥大學(xué)
• 主分類號(hào): G01N30/02
• 分類號(hào): G01N30/02
• 代理公司: 北京柏杉松知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11413
• 代理人: 張函;王春偉

本發(fā)明公開了淫羊藿提取物中16種化學(xué)成分含量的測定方法，采用HPLC?MS/MS法，同時(shí)測定淫羊藿提取物中16種化學(xué)成分的含量；所述方法包括：(1)建立16種化學(xué)成分的標(biāo)準(zhǔn)曲線；(2)獲得淫羊藿提取物中各16種化學(xué)成分的多反應(yīng)離子色譜圖；(3)確定淫羊藿提取物中16種化學(xué)成分的含量；本發(fā)明的方法具有靈敏度高，可靠性強(qiáng)，高效快速的特點(diǎn)，通過測定淫羊藿提取物中16種化學(xué)成分的含量，可以更有效地對(duì)淫羊藿提取物進(jìn)行質(zhì)量控制，從而保證淫羊藿提取物的臨床療效。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及中藥質(zhì)量分析領(lǐng)域，特別涉及淫羊藿提取物中16種化學(xué)成分含量的測定方法。

背景技術(shù)

淫羊藿Epimedii Herba來源于小檗科(Berberidaceae)淫羊藿屬Epimedium L.植物，是中國傳統(tǒng)補(bǔ)益類中藥，有悠久的用藥歷史。《中國藥典》2015年版收載了4種淫羊藿，即淫羊藿Epimedium brevicornu Maxim.、箭葉淫羊藿Epimedium sagittatum(Sieb.etZucc.)Maxim.、柔毛淫羊藿Epimedium pubescensMaxim.、朝鮮淫羊Epimedium koreanumNakai.的干燥葉。本品味辛、甘，性溫，歸肝、腎經(jīng)，具有補(bǔ)腎陽、強(qiáng)筋骨、祛風(fēng)濕的作用。淫羊藿中含有黃酮類、木脂素類、苯酚苷類、生物堿類、多糖類等多種化學(xué)成分，其主要藥效成分為黃酮類化合物。現(xiàn)代藥理研究表明，淫羊藿具有增強(qiáng)免疫力、改善心血管系統(tǒng)功能、抗炎、抗腫瘤、促進(jìn)骨細(xì)胞增殖等藥理作用，具有廣闊的用藥前景。但淫羊藿藥材中總黃酮的含量較低；隨著中藥提取技術(shù)的日益發(fā)展，淫羊藿提取物作為淫羊藿藥材的加工產(chǎn)物，逐漸成為眾多中藥制劑的重要原料。目前，淫羊藿提取物的質(zhì)量控制多采用高效液相色譜法、紫外分光光度法等方法對(duì)淫羊藿提取物中單一或者少量成分的含量進(jìn)行測定；一方面，上述的檢測方法靈敏度、專屬性低，另一方面，淫羊藿提取物所含化學(xué)成分繁多，僅控制一個(gè)或者少量成分并不能有效地對(duì)其進(jìn)行質(zhì)量控制，因此需要一種全新的淫羊藿提取物中化學(xué)成分含量的測定方法，以能夠更加可信、更加全面的對(duì)淫羊藿提取物進(jìn)行質(zhì)量控制。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種淫羊藿提取物中16種化學(xué)成分含量的測定方法，以實(shí)現(xiàn)更加可信、更加全面的的對(duì)淫羊藿提取物進(jìn)行質(zhì)量控制。具體技術(shù)方案如下：

一種淫羊藿提取物中16種化學(xué)成分含量的測定方法，采用HPLC-MS/MS法，同時(shí)測定淫羊藿提取物中16種化學(xué)成分的含量；所述16種化學(xué)成分包括：寶霍苷II、寶霍苷I、朝霍定A、朝霍定B、朝霍定C、槲皮苷、箭霍苷A、箭霍苷B、金絲桃苷、綠原酸、木蘭花堿、新綠原酸、隱綠原酸、淫羊藿次苷I、淫羊藿苷、紫云英苷，所述方法包括：

(1)建立16種化學(xué)成分的標(biāo)準(zhǔn)曲線

分別精密稱定對(duì)照品寶霍苷II、寶霍苷I、朝霍定A、朝霍定B、朝霍定C、槲皮苷、箭霍苷A、箭霍苷B、金絲桃苷、綠原酸、木蘭花堿、新綠原酸、隱綠原酸、淫羊藿次苷I、淫羊藿苷、紫云英苷，用體積分?jǐn)?shù)為70-100％的甲醇溶解，制成具有已知濃度的各對(duì)照品儲(chǔ)備溶液；然后分別精密吸取16種對(duì)照品儲(chǔ)備溶液并將其混合，用體積分?jǐn)?shù)為70-100％的甲醇稀釋，配制成分別具有已知濃度的16種化學(xué)成分的對(duì)照品混合儲(chǔ)備液；

用體積分?jǐn)?shù)為70-100％的甲醇將所述對(duì)照品混合儲(chǔ)備液稀釋成一系列分別具有不同已知濃度的16種化學(xué)成分的對(duì)照品混合溶液；

在相同的預(yù)設(shè)色譜條件和質(zhì)譜條件下，將V₁體積的各濃度的對(duì)照品混合溶液分別注入高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀中，獲得各對(duì)照品在不同濃度下的多反應(yīng)離子色譜圖；

以各對(duì)照品的色譜峰峰面積Y為縱坐標(biāo)，以各對(duì)照品的濃度X為橫坐標(biāo)，通過線性回歸運(yùn)算得到各化學(xué)成分的標(biāo)準(zhǔn)曲線；

(2)獲得淫羊藿提取物中各16種化學(xué)成分的多反應(yīng)離子色譜圖