[發明專利]一種天冬氨酸氨基轉移酶檢測試劑盒及其制備使用方法

在審

• 申請號: 201710915774.0
• 申請日: 2017-09-30
• 公開（公告）號: CN107764989A
• 公開（公告）日: 2018-03-06
• 發明（設計）人: 吳澤東;朱衛中;張金東;吳錚;朱雨;周珍珍
• 申請（專利權）人: 安徽伊普諾康生物技術股份有限公司
• 主分類號: G01N33/535
• 分類號: G01N33/535
• 代理公司: 合肥市浩智運專利代理事務所(普通合伙)34124
• 代理人: 王志興

1.一種天冬氨酸氨基轉移酶檢測試劑盒，其特征在于，包括彼此獨立的試劑R1和試劑R2雙液體組分，包括的成分及相應含量為：

試劑R1：

試劑R2：

2.根據權利要求1所述的天冬氨酸氨基轉移酶檢測試劑盒，其特征在于，所述試劑R1的pH為7.0-8.5。

3.根據權利要求1所述的天冬氨酸氨基轉移酶檢測試劑盒，其特征在于，所述試劑R2的pH為7.5-8.0。

4.一種制備如權利要求1-3任一項所述的天冬氨酸氨基轉移酶檢測試劑盒的方法，其特征在于，包括如下步驟：

(1)配制試劑R1

a.按照試劑R1的組分含量，將三羥甲基氨基甲烷溶于純化水中，攪拌均勻，待充分溶解，配制成R1緩沖液；

b.按照試劑R1的組分含量，將三羥甲基氨基甲烷鹽酸鹽、乙二胺四乙酸二鈉鹽、迭氮鈉、天冬氨酸溶于R1緩沖液中，攪拌均勻，待所有原料充分溶解，調節pH；

c.按照試劑R1的組分含量，將NADH、G6PD溶于上述步驟所得的混合溶液中，攪拌均勻，即制得試劑R1；

(2)配制試劑R2

a.按照試劑R2的組分含量，將三羥甲基氨基甲烷溶于純化水中，攪拌均勻，待充分溶解，配制成R2緩沖液；

b.按照試劑R2的組分含量，將三羥甲基氨基甲烷鹽酸鹽、α-酮戊二酸溶于R2緩沖液中，攪拌均勻，待所有原料充分溶解，調節pH；

c.按照試劑R2的組分含量，將蘋果酸脫氫酶溶于上述步驟所得的混合溶液中，攪拌均勻，即制得試劑R2。

5.一種使用如權利要求1-3任一項所述的天冬氨酸氨基轉移酶檢測試劑盒的方法，其特征在于，包括如下步驟：

(1)將待測樣品與試劑R1混合均勻，37℃孵育1min；

(2)用全自動生化分析儀測定步驟(1)反應后的吸光度A1，

(3)再與試劑R2混合均勻，37℃孵育2min；

(4)用全自動生化分析儀測定步驟(3)反應后的吸光度A2；

(5)根據A1和A2的吸光度變化值計算出樣本中的天冬氨酸氨基轉移酶的濃度。

6.根據權利要求5所述的天冬氨酸氨基轉移酶檢測試劑盒的使用方法，其特征在于，所述步驟(1)中試劑R1和步驟(3)中試劑R2的體積比為2:1。

7.根據權利要求5所述的天冬氨酸氨基轉移酶檢測試劑盒的使用方法，其特征在于，所述步驟(2)和步驟(4)中，在主波長340nm、副波長405nm處測定吸光度A1和A2。

8.根據權利要求5所述的天冬氨酸氨基轉移酶檢測試劑盒的使用方法，其特征在于，所述待測樣品與試劑R1、試劑R2構成的總試劑的體積比為1：20。

9.根據權利要求5所述的天冬氨酸氨基轉移酶檢測試劑盒的使用方法，其特征在于，所述步驟(5)中A1和A2的吸光度變化值為ΔA，即A1數值減去A2數值后的差值。