[發明專利]一種檢測畜禽肉制品中添加劑的方法

有效

• 申請號: 201710911432.1
• 申請日: 2017-09-29
• 公開（公告）號: CN107677758B
• 公開（公告）日: 2020-08-25
• 發明（設計）人: 劉瑜;趙穎;張柏瑀;姜玲玲;李曉東;金雁;吳渺渺;張彤;于麗;李小革
• 申請（專利權）人: 沈陽海關技術中心
• 主分類號: G01N30/89
• 分類號: G01N30/89;G01N30/72;G01N30/86
• 代理公司: 北京弘權知識產權代理事務所(普通合伙) 11363
• 代理人: 逯長明;許偉群

1.一種檢測畜禽肉制品中添加劑的方法，其特征在于，包括如下步驟：

1)樣品前處理：

稱取樣品放置于離心管中，并加入體積濃度為50％的乙醇水溶液，進行振蕩提取、離心后，收集上清液于另一離心管中，再加入體積濃度為50％的乙醇水溶液重復提取一次，得提取液；

將提取液經中性氧化鋁柱凈化，濃縮、定容后，備用；

2)定性分析：

運用UPLC-MS/MS-Qtrap法對經過樣品前處理的待檢測畜禽肉制品樣品進行篩查，采用液相色譜-串聯四極桿線性離子阱質譜儀的增強子離子掃描功能，建立MRM-IDA-EPI篩查方法，獲得待檢測畜禽肉制品樣品中各目標添加劑母離子的MS²譜圖，用已知數據庫中各添加劑的標準MS²譜圖與獲得待檢測畜禽肉制品樣品中各目標添加劑母離子的MS²譜圖分別進行對比后，獲得相似度值，并且匹配兩者的特征碎片離子，進而判斷待檢測畜禽肉制品樣品中是否含有目標添加劑；

3)定量分析：

分別稱取各添加劑標準品，用水分別配制10μg/mL的標準儲備液，備用；

按照步驟1)中的樣品前處理方法對空白樣品進行處理后，用空白樣品基質溶液稀釋標準儲備液，制成混合標準儲備溶液；

將混合標準儲備溶液定容后，得到空白樣品基質溶液，配制濃度為0.05μg/mL～5.0μg/mL的系列匹配標準工作溶液；

采用液相色譜-串聯四極桿線性離子阱質譜儀對系列匹配標準工作溶液和經過樣品前處理的待檢測畜禽肉制品樣品分別進行測定，獲得以濃度為橫坐標，定量離子的峰面積為縱坐標的繪制標準曲線，以此標準曲線來計算待檢測畜禽肉制品樣品中目標添加劑的含量；

所述添加劑包括：糖精鈉、安賽蜜、甜蜜素、阿斯巴甜、山梨酸、苯甲酸、脫氫乙酸、乙萘酚、水楊酸、阿力甜、紐甜、對羥基苯甲酸甲酯、對羥基苯甲酸乙酯、對羥基苯甲酸丙酯和對羥基苯甲酸丁酯；

所述步驟1)樣品前處理具體為：

稱取樣品5.00g放置于100mL離心管中，并加入20mL體積濃度為50％的乙醇水溶液，震蕩提取20min，以8000r/min離心5min，收集上清液于另一離心管中，再加入20mL體積濃度為50％的乙醇水溶液重復提取一次，得提取液；

將提取液過中性氧化鋁填充的玻璃柱后，收集20mL溶液在40℃下旋轉蒸發至近干，加入1.0mL體積溶度為20％的乙醇水溶液溶解殘渣，過0.22μm濾膜，備用；

所述步驟2)中液相色譜-串聯四極桿線性離子阱質譜儀的質譜條件為：

離子源：電噴霧離子源；

掃描模式：負離子掃描；

采集模式：多反應監測；

信息關聯掃描：強度閾值100cps；

增強子離子掃描：質量數采集范圍m/z 50～1000Da；

電噴霧電壓：-4500V；

霧化氣壓力：50psi；

氣簾氣壓力：30psi；

輔助氣壓力：50psi；

離子源溫度：500℃；

入口電壓：-10V；

碰撞室出口電壓：-10V；

碰撞氣能量：20、35、50V；

擴展碰撞能量：15V；

所述步驟3)中液相色譜-串聯四極桿線性離子阱質譜儀的色譜條件為：

色譜柱：Waters BEH C₁₈反相色譜柱；

柱溫：40℃；

進樣體積：10μL；

流速：0.2mL/min；

流動相：流動相A：0.02mol/L乙酸銨水溶液，B：甲醇，梯度洗脫程序：0min，90％A；1min，90％A；5min，10％A；7min，10％A；7.1min，90％A；12min，90％A；

所述步驟3)中液相色譜-串聯四極桿線性離子阱質譜儀的質譜條件為：

離子源：電噴霧離子源；

掃描模式：負離子掃描；

采集模式：多反應監測；

電噴霧電壓：-4500V；

霧化氣壓力：50psi；

氣簾氣壓力：30psi；

輔助氣壓力：50psi；

離子源溫度：500℃；

入口電壓：-10V；

碰撞室出口電壓：-10V。

2.根據權利要求1所述檢測畜禽肉制品中添加劑的方法，其特征在于，所述待檢測畜禽肉制品樣品為醬牛肉或香腸。