[發明專利]熱穩定性疫苗組合物及其制備方法

在審

• 申請號: 201710905489.0
• 申請日: 2012-05-17
• 公開（公告）號: CN107625958A
• 公開（公告）日: 2018-01-26
• 發明（設計）人: K·哈西特;P·南迪;R·布雷;J·卡彭特;T·倫道夫
• 申請（專利權）人: 索利吉尼克斯公司;科羅拉多大學評議會公司
• 主分類號: A61K39/00
• 分類號: A61K39/00;A61K9/19;A61K47/26;A61K47/18
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司11245
• 代理人: 王永偉,丁秀云

本申請是發明名稱為“熱穩定性疫苗組合物及其制備方法”、申請號為“201280035108.3(PCT/US2012/038457)”、申請日為2012年5月17日的申請的分案申請。

政府支持聲明

本發明在國立健康研究所UO1-A1-08-2210授權下由政府支持作出。政府具有本發明的某些權利。

技術領域

本發明一般涉及干燥疫苗組合物的領域。更具體而言，涉及生產結合至佐劑并且包含免疫刺激分子的干燥疫苗組合物的方法。

背景技術

包含重組蛋白的疫苗受益于或絕對需要佐劑，以誘發免疫應答。(Callahan等,1991,The importance of surface charge in the optimization of antigen-adjuvant interactions,Pharm.Res.8(7):851-858；Singh和O'Hagan 1999,Advances in vaccine adjuvants,Nat Biotechnol 17(11):1075-81；以及O'Hagan等,2001,Recent developments in adjuvants for vaccines against infectious diseases,Biomol Eng 18(3):69-85)。鋁鹽佐劑是目前最廣泛使用的一般用于人的佐劑，這是因為在施用至兒童和成人的疫苗中安全使用的長久歷史。FDA批準的疫苗中目前出現的唯一佐劑是鋁鹽佐劑、氫氧化鋁和磷酸鋁。鋁鹽佐劑提高疫苗的免疫原性并且通過減少疫苗中蛋白質劑量水平引起接種結果的顯著提高，提高了保護性抗體的滴度，并且減少了在已經完成主要系列接種之后的每年接種需要。但是，在基于重組蛋白、肽和化學合成疫苗的許多亞單位疫苗中鋁鹽佐劑的使用存在明顯的限制。這些限制包括疫苗存儲和穩定性的一般方面，因為包含鋁佐劑的疫苗僅僅在窄溫度范圍內可存儲，并且不能冷凍。進一步限制包括普遍接受的觀點：鋁佐劑相對弱，不促進細胞免疫的發展，并且在中和抗體需要用于阻斷病毒感染或阻止生物毒素活性的情況下可利于開發非中和的抗體。

在鋁佐劑的情況下，已經建議，為了提供足夠的免疫原性，抗原必須被吸附在佐劑的表面上。(Gupta等,1995,Adjuvant Properties of Aluminum and Calcium Compounds.Pharmaceutical Biotechnology.6:229-248；以及White和Hem,2000,Characterization of aluminium-containing adjuvants,Dev Biol(Basel)103:217-28)。通常通過抗原和佐劑之間的靜電相互作用促進該吸附，并且通常選擇配制pH以使抗原和佐劑帶相反的電荷(Callahan等1991)。也可通過與緩沖鹽如磷酸鹽、琥珀酸鹽和檸檬酸鹽的表面交換反應，改變佐劑上的表面電荷(Hem和White,1984,Characterization of aluminum hydroxide for use as an adjuvant in parenteral vaccines.J Parenter Sci Technol,38(1):p.2-10；Chang等,1997,Role of the electrostatic attractive force in the adsorption of proteins by aluminum hydroxide adjuvant.PDA J Pharm Sci Technol,51(1):p.25-9；以及Rinella等,1996,Treatment of aluminium hydroxide adjuvant to optimize the adsorption of basic proteins.Vaccine,14(4):p.298-300)。對鋁鹽佐劑的作用機制了解不多，但是可能是由于數個不同的機制。(Lindblad 2004."Aluminium compounds for use in vaccines"Immunol.Cell.Biol.82(5):497-505；Gupta和Siber,1995,Adjuvants for Human Vaccines--Current Status,Problems and Future-Prospects.Vaccine13(14):1263-1276；Gupta和Rost,2000,Aluminum Compounds as Vaccine Adjuvants,In O'Hagan D,editor Vaccine Adjuvants:Preparation Methods and Research Protocols,ed.,Totowa,N.J.:Humana Press Inc.p 65-89；Cox和Coulter,1997,Adjuvants--a classification and review of their modes of action,Vaccine 15(3):248-256)。通常提出的機制是佐劑用作在注入部位的儲庫，其中抗原在施用后緩慢釋放。(Cox和Coulter，1997)。另一提出的機制是佐劑幫助遞送抗原至抗原呈遞細胞(Lindblad 2004)。進一步提出的機制是佐劑用作免疫刺激劑并且誘發Th2細胞因子(Grun和Maurer 1989,Different T helper cell subsets elicited in mice utilizing two different adjuvant vehicles:the role of endogenous interleukin 1in proliferative responses.Cell Immunol 121(1):134-145)。仍另一提出的機制是佐劑使得佐劑表面上的蛋白質抗原不穩定，造成它們更容易遭受蛋白水解降解(Jones等,2005,Effects of adsorption to aluminum salt adjuvants on the structure and stability of model protein antigens.J Biol Chem 280(14):13406-13414；以及That等,2004."Antigen stability controls antigen presentation"J.Biol.Chem.279(48):50257-50266)。