[發明專利]一種調節性T細胞的制備方法及其應用

在審

• 申請號: 201710905472.5
• 申請日: 2017-09-28
• 公開（公告）號: CN107519202A
• 公開（公告）日: 2017-12-29
• 發明（設計）人: 孫啟全;鄭頌國;廖濤;薛有求;趙大強;李思雯
• 申請（專利權）人: 中山大學附屬第三醫院
• 主分類號: A61K35/17
• 分類號: A61K35/17;A61P13/12;A61P37/06;C12N5/0783
• 代理公司: 廣州三環專利商標代理有限公司44202
• 代理人: 宋靜娜,郝傳鑫

1.TGF-β體外誘導產生的調節性T細胞在制備(a)防治抗體介導的移植腎排斥和損傷，或者(b)改善移植腎存活的藥物中的應用。

2.TGF-β體外誘導產生的調節性T細胞在制備減少移植腎內炎癥細胞浸潤的藥物中的應用。

3.如權利要求2所述的應用，其特征在于：所述炎癥細胞為(a)B細胞和漿細胞、(b)CD4⁺細胞和CD8⁺IFN-γ⁺細胞、(c)M1型巨噬細胞，或(d)NK細胞和樹突狀細胞。

4.如權利要求3所述的應用，其特征在于：所述CD4⁺細胞包括Th1細胞，Th17細胞和Tfh細胞。

5.一種用于防治抗體介導的移植腎排斥/損傷、改善移植腎存活或減少移植腎內炎癥細胞浸潤的藥物，其特征在于：所述藥物包括TGF-β體外誘導產生的調節性T細胞。

6.如權利要求5所述的藥物，其特征在于：所述藥物還包括藥用載體。

7.一種調節性T細胞的制備方法，其特征在于：包括以下步驟：通過TGF-β體外誘導制得調節性T細胞。

8.如權利要求7所述的制備方法，其特征在于：包括以下步驟：向TGF-β中加入初始CD4+細胞、IL-2、抗CD3/CD28磁珠和完全培養液，體外誘導制得調節性T細胞。

9.如權利要求8所述的制備方法，其特征在于：所述初始CD4+細胞的制備方法包括以下步驟：(1)將小鼠脾臟置于培養基中，研磨，吸取細胞懸液；(2)離心細胞懸液，棄上清后加入紅細胞裂解液，重懸細胞，再進行裂解，然后加入所述培養基，混勻，終止裂解；(3)用所述培養基重懸并計數；(5)分選初始CD4+細胞。

10.如權利要求9所述的制備方法，其特征在于：所述步驟(5)采用一步陰選分選初始CD4+細胞。