[發(fā)明專利]三種重組糖化酶及其制備方法與應(yīng)用有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201710903102.8 | 申請日： | 2017-09-29 |
| 公開（公告）號： | CN107475219B | 公開（公告）日： | 2020-06-09 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 黎明;袁顥瑜;路福平 | 申請（專利權(quán)）人： | 天津科技大學(xué) |
| 主分類號： | C12N9/34 | 分類號： | C12N9/34;C12N15/56;C12N15/81;C12N1/19;C12R1/84 |
| 代理公司： | 北京瑞盛銘杰知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11617 | 代理人： | 郭曉迪 |
| 地址： | 300222 天*** | 國省代碼： | 天津;12 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 重組 糖化酶 及其 制備 方法 應(yīng)用 | ||
1.重組糖化酶，其特征在于，其氨基酸序列如SEQ ID NO：1或SEQ ID NO：2或SEQ IDNO：3所示。
2.權(quán)利要求1所述重組糖化酶的用途，其特征在于，用于催化可溶性淀粉生產(chǎn)葡萄糖。
3.如權(quán)利要求2所述重組糖化酶的用途，其特征在于，所述重組糖化酶的酶活為22041.3U/mL或17962.9U/mL或20163.8U/mL，和/或所述重組糖化酶在60℃放置4h殘余酶活為60%或46%或61%，和/或所述重組糖化酶在pH4.0放置6h殘余酶活為74%或70%或82%。
4.包含權(quán)利要求1所述重組糖化酶基因的表達(dá)載體。
5.如權(quán)利要求4所述的表達(dá)載體，其特征在于，所述的表達(dá)載體為pJ912-19。
6.包含權(quán)利要求1所述重組糖化酶基因的宿主細(xì)胞。
7.如權(quán)利要求6所述宿主細(xì)胞，其特征在于，所述宿主細(xì)胞為畢赤酵母X-33。
8.權(quán)利要求1所述重組糖化酶的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：
（1）將SEQ ID NO：10或SEQ ID NO：11或SEQ ID NO：12所示的重組糖化酶基因經(jīng)過酶切、純化，連接到pJ912-19載體，得到重組表達(dá)載體；
（2）所述的重組表達(dá)載體轉(zhuǎn)化至畢赤酵母X-33，得到重組菌株；
（3）表達(dá)所述的重組菌株，純化獲得重組糖化酶。
9.如權(quán)利要求8所述的重組糖化酶的制備方法，其特征在于，所述重組糖化酶的酶活為22041.3U/mL或17962.9U/mL或20163.8U/mL，和/或所述重組糖化酶在60℃放置4h殘余酶活為60%或46%或61%，和/或所述重組糖化酶在pH4.0放置6h殘余酶活為74%或70%或82%。
10.權(quán)利要求1所述重組糖化酶的編碼基因，其特征在于，其核苷酸序列：
（a）：如SEQ ID NO：10或SEQ ID NO：11或SEQ ID NO：12所示；
或（b）：與（a）的核苷酸序列互補。
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