[發明專利]可誘導分泌抗CD47抗體的工程化免疫細胞

在審

• 申請號: 201710891841.X
• 申請日: 2017-09-27
• 公開（公告）號: CN109554348A
• 公開（公告）日: 2019-04-02
• 發明（設計）人: 劉麗萍;曹衛;馬安云;何佳平
• 申請（專利權）人: 亙喜生物科技（上海）有限公司
• 主分類號: C12N5/10
• 分類號: C12N5/10;C12N15/85;A61P35/00
• 代理公司: 上海一平知識產權代理有限公司 31266
• 代理人: 徐迅;鄭震

本發明涉及可誘導分泌抗CD47抗體的工程化免疫細胞。具體地，本發明涉及一種在CAR和/或外源TCR被激活時可誘導分泌抗CD47抗體的免疫細胞(如CAR?T細胞)。本發明免疫細胞僅在CAR和/或外源TCR被激活時表達抗CD47抗體，僅在腫瘤微環境中特異性分泌，毒副作用小。本發明免疫細胞可誘導分泌抗CD47抗體，解除CD47陽性腫瘤細胞對于巨噬細胞的抑制，反向促進巨噬細胞去攻擊腫瘤細胞，并與CAR和/或外源TCR協同作用，腫瘤細胞殺傷效果顯著增強，能同時殺傷表達CAR和/或外源TCR靶向的抗原的腫瘤細胞和CD47陽性腫瘤細胞，防止腫瘤細胞的免疫逃逸，不易脫靶和復發。

技術領域

本發明屬于腫瘤免疫細胞治療領域，具體地，涉及一種可誘導分泌抗CD47抗體的工程化免疫細胞。

背景技術

細胞免疫治療是一種新興的、具有顯著療效的腫瘤治療模式，是一種自身免疫抗癌的新型治療方法。它是運用生物技術和生物制劑對從病人體內采集的免疫細胞進行體外培養和擴增后回輸到病人體內的方法，來激發、增強機體自身免疫功能，從而達到治療腫瘤的目的。

近年來，嵌合抗原受體基因修飾T(CAR-T)細胞作為“活的藥物”在血液腫瘤治療中取得了令人振奮的效果，成為腫瘤治療新的發展方向。CAR的設計經歷了以下過程：第一代CAR只有一個胞內信號組份CD3ζ或者FcγRI分子，由于胞內只有一個活化結構域，因此它只能引起短暫的T細胞增殖和較少的細胞因子分泌，而并不能提供長時間的T細胞增殖信號和持續的體內抗腫瘤效應，所以并沒有取得很好地臨床療效。第二代CAR在原有結構基礎上引入一個共刺激分子，如CD28、4-1BB、OX40、ICOS，與一代CAR相比功能有很大提高，進一步加強CAR-T細胞的持續性和對腫瘤細胞的殺傷能力。在二代CAR基礎上串聯一些新的免疫共刺激分子如CD27、CD134，發展成為三代和四代CAR。現在血液腫瘤的臨床試驗中應用最多的是第二代CAR。

CAR-T細胞在血液系統惡性腫瘤的治療中顯示出前所未有的療效，如對晚期復發難治性急性淋巴細胞白血病(ALL)治療的完全緩解(CR)可達到90％，對慢性淋巴細白血病(CLL)和部分B細胞淋巴瘤的CR達到50％以上。雖然CAR-T在治療白血病和淋巴瘤上潛力很大，但在治療很多實體瘤和一些血液瘤上效果欠佳。目前CAR-T細胞療法在血液腫瘤的治療過程中尚存在脫靶效應、毒副作用、體內持續時間短、復發率高等問題。CAR-T細胞在治療實體瘤方面，其安全性和有效性述已得到證實，但療效還有待提高。

CD47是治療腫瘤的一個潛在靶點，目前研究主要集中在使用靶向CD47的抗體來進行腫瘤治療。但是，由于CD47普遍表達于正常組織中，全身性的輸注抗體會帶來很多的脫靶毒副作用，比如貧血、神經毒性等。因此較少使用靶向CD47的抗體來治療表達CD47的腫瘤。

綜上所述，本領域仍然需要進一步的研究，開發一種能更有效、特異性好、副作用小地治療腫瘤的工程化免疫細胞。

發明內容

本發明的目的是提供一種能更有效、特異性好、副作用小地治療腫瘤的工程化免疫細胞(如CAR-T細胞)。

本發明的又一目的是提供一種可誘導分泌抗CD47抗體的工程化免疫細胞(如CAR-T細胞)及其制法和應用。

本發明的第一方面，提供了一種工程化的免疫細胞，所述工程化的免疫細胞為T細胞或NK細胞，并且所述的免疫細胞細胞具有以下特征：

(a)所述免疫細胞表達嵌合抗原受體CAR或外源TCR，所述CAR靶向腫瘤細胞的標志物，所述外源TCR靶向腫瘤細胞的標志物；和

(b)當所述CAR被激活和/或所述外源TCR被激活時，所述免疫細胞誘導分泌抗CD47抗體。

在另一優選例中，所述的工程化的免疫細胞選自下組：

(i)嵌合抗原受體T細胞(CAR-T細胞)；