[發(fā)明專利]一種用于鑒定煙草對南方根結(jié)線蟲抗性的瞬時表達(dá)載體在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 201710887458.7 | 申請日： | 2017-09-27 |
| 公開（公告）號： | CN107619834A | 公開（公告）日： | 2018-01-23 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 徐世曉;薛剛;楊鐵釗;李曉輝;王袁 | 申請（專利權(quán)）人： | 河南農(nóng)業(yè)大學(xué) |
| 主分類號： | C12N15/82 | 分類號： | C12N15/82;C12N15/66 |
| 代理公司： | 鄭州紅元帥專利代理事務(wù)所(普通合伙)41117 | 代理人： | 楊妙琴 |
| 地址： | 450022 河*** | 國省代碼： | 河南;41 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 用于 鑒定 煙草 南方 線蟲 抗性 瞬時 表達(dá) 載體 | ||
【權(quán)利要求書】：
1.一種用于鑒定煙草對南方根結(jié)線蟲抗性的瞬時表達(dá)載體，其特征在于，是由SEQ ID NO.1所示序列通過5’ Pstl和 3’ Sacl克隆至載體pCAMBIA2300-LIC獲得。
2.一種根據(jù)權(quán)利要求1所述用于鑒定煙草對南方根結(jié)線蟲抗性的瞬時表達(dá)載體的構(gòu)建方法，其特征在于，包括以下步驟：
（1）人工合成病毒PVY-NIB的CDNA片段：在PVY-NIB的CDNA片段序列中5’端加入克隆位點Pstl和3’端加入克隆位點Sacl，加入克隆位點后的序列為SEQ ID NO.1；
（2）pCAMBIA2300-LIC:PVY-NIB瞬時表達(dá)載體構(gòu)建：將pCAMBIA2300-LIC空載體進(jìn)行雙酶切，并通過T4 DNA連接酶將空載體pCAMBIA2300-LIC和步驟（1）中的加入克隆位點后人工合成的PVY-NIB的CDNA片段進(jìn)行連接，構(gòu)建pCAMBIA2300-LIC:PVY-NIB瞬時表達(dá)載體。
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