[發(fā)明專利]一種食用油中多環(huán)芳烴的液相色譜檢測方法

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201710879257.2
• 申請(qǐng)日: 2017-09-26
• 公開（公告）號(hào): CN107607657A
• 公開（公告）日: 2018-01-19
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 高洪良;陳軍;王銳;林俊伶;時(shí)紅;張攀;仇東朝;徐偉
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 山東龍大糧油有限公司
• 主分類號(hào): G01N30/06
• 分類號(hào): G01N30/06
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于食品安全檢測技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種食用油中多環(huán)芳烴的液相色譜檢測方法。

背景技術(shù)

多環(huán)芳烴(Polycyclic Aromatic Hydrocarbons PAHs) 是指兩個(gè)以上苯環(huán)以稠環(huán)形式相連的化合物，是重要的環(huán)境和食品污染物。目前已發(fā)現(xiàn)的200多種多環(huán)芳烴中具有致癌作用的多為四到六環(huán)的重質(zhì)多環(huán)芳烴。國際癌研究中心（IARC）（1976年）列出的94種對(duì)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物致癌的化合物。其中15種屬于多環(huán)芳烴，由于苯并[a]芘是第一個(gè)被發(fā)現(xiàn)的環(huán)境化學(xué)致癌物，而且致癌性很強(qiáng)，故常以苯并[a]芘作為多環(huán)芳的代表，它占全部致癌性多環(huán)芳烴1%-20%。多環(huán)芳烴廣泛分布于環(huán)境中,可以在我們生活的每一個(gè)角落發(fā)現(xiàn),任何有有機(jī)物加工、廢棄、燃燒或使用的地方都有可能產(chǎn)生多環(huán)芳烴。

相關(guān)限量要求：《GB 2716-2005食用植物油衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)》、《GB 2762-2017 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中污染物限量》中均規(guī)定食用油中苯并[a]芘含量≤10μg/kg。2017.04月國家糧食局發(fā)起“中國好糧油行動(dòng)計(jì)劃”，并于2017.09.15發(fā)布《LS/T 3249—2017 中國好糧油 食用植物油》行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)，將多環(huán)芳烴（苯并[a]芘、苯并[a]蒽、苯并[b]熒蒽、屈的總和）列為食用植物油聲稱指標(biāo)。

目前文獻(xiàn)中常見的多環(huán)芳烴檢測多采用佛羅里硅土或多環(huán)芳烴專用柱，樣液上柱后經(jīng)試劑淋洗凈化后，再進(jìn)行洗脫，收集流出液進(jìn)行檢測。該方式最大缺點(diǎn)是萘、苊、芴、菲等極性較強(qiáng)的化合物SPE柱對(duì)其保留性較差，回收率很低甚至無回收。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明克服了以上缺點(diǎn)，提供了一種食用油中多環(huán)芳烴的液相色譜檢測方法，該方法高效、穩(wěn)定、回收率較高，檢測設(shè)備普及率高。

本發(fā)明一種食用油中多環(huán)芳烴的液相色譜檢測方法的目的是這樣實(shí)現(xiàn)的，其特點(diǎn)在于具體包括如下步驟：

1）提取：稱取2g樣品于50ml潔凈的離心管中，加入2ml乙腈飽和的正己烷溶解食用油，再加入20ml正己烷飽和的乙腈提取，振蕩3min，0℃冷凍5min后離心，轉(zhuǎn)移乙腈層至100ml茄型瓶中，殘留的混合層用20ml正己烷飽和的乙腈重復(fù)上述提取步驟，合并乙腈層至茄型瓶中，得到提取液。

2）減壓濃縮：將步驟1）所得提取液在40℃水浴環(huán)境減壓濃縮至2ml左右，得到濃縮液。

3）SPE凈化：將步驟2）所得濃縮液轉(zhuǎn)入預(yù)先用6ml乙腈淋洗的C18凈化柱，收集流出液于帶刻度玻璃管中，用2+2ml乙腈分兩次洗滌茄形瓶，洗滌液也轉(zhuǎn)入C18凈化柱中，合并流出液至玻璃管中，得到淋洗液。

4）氮吹濃縮：將步驟3）所得淋洗液在溫度＜40℃環(huán)境氮吹濃縮至＜1ml，得到濃縮液。

5）定容：將步驟4）所得濃縮液用乙腈定容至1ml，并過0.2μm針筒式濾膜于進(jìn)樣瓶中，得到待檢溶液。

6）檢測分析：將步驟5）所得待檢溶液用HPLC分析檢測。

本發(fā)明用高效液相色譜法檢測食用油中的多環(huán)芳烴，作以下改進(jìn)：

進(jìn)一步地，步驟1）其中食用油與乙腈飽和正己烷的總用量之比為2g:1~2.5ml ，優(yōu)選2g:2ml。溶解后混合溶液的密度稍大于正己烷飽和的乙腈，離心后乙腈層在上層，方便移取。

進(jìn)一步地，步驟1）中所述分別用正己烷和乙腈互相飽和的溶劑作溶解和提取試劑，使正己烷與油混合層的體積保持不變，減少乙腈對(duì)正己烷的溶解，保持良好的分散體系。另外離心前在0℃冷凍5min，降低食用油在乙腈中的溶解度。

進(jìn)一步地，步驟2）提取液減壓濃縮至近干，約1~3ml，優(yōu)選2ml左右。若剩余溶液過多，在SPE柱凈化時(shí)易將凈化柱上保留的油脂洗脫，導(dǎo)致凈化效果變差。

進(jìn)一步地，步驟3） SPE凈化柱需要提前用6ml乙腈預(yù)淋洗，去除柱管上可能存在的污染。SPE凈化柱可選用C18或者中性氧化鋁，凈化效果基本相當(dāng)，優(yōu)選C18凈化柱。

進(jìn)一步地，步驟6）同時(shí)檢測15種多環(huán)芳烴，單一波長無法實(shí)現(xiàn)較好的靈敏度，因此需針對(duì)不同的多環(huán)芳烴出峰時(shí)間分段波長檢測。

本發(fā)明作為一種優(yōu)選方案，液相色譜的檢測條件包括：

色譜條件：

色譜柱：Eclipse PAH （5μm，4.6×250mm）反相色譜柱；

柱溫：30℃；

進(jìn)樣體積：20μl；

流動(dòng)相：A 水，B 乙腈；

流動(dòng)相梯度：

波長分段參數(shù)：

附圖說明