[發明專利]基于DNA條形碼的海水蟹類物種鑒別方法在審
| 申請號： | 201710879103.3 | 申請日： | 2017-09-26 |
| 公開（公告）號： | CN108330169A | 公開（公告）日： | 2018-07-27 |
| 發明（設計）人： | 胡則輝;柴學軍;王躍斌;胡成碩 | 申請（專利權）人： | 浙江省海洋水產研究所 |
| 主分類號： | C12Q1/68 | 分類號： | C12Q1/68;C12N15/11 |
| 代理公司： | 嘉興永航專利代理事務所(普通合伙) 33265 | 代理人： | 侯蘭玉 |
| 地址： | 316021 浙江*** | 國省代碼： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 蟹類 物種鑒別 堿基序列 目的片段 條形碼 引物 種蟹 海水 分子生物學鑒別 比對分析 核苷酸序 堿基數 物種 | ||
【權利要求書】：
1.一種基于DNA條形碼的海水蟹類物種鑒別方法，其特征在于：該方法包括以下步驟：
(1)蟹類DNA提??；
(2)利用DNA條形碼引物進行PCR擴增，擴增出217bp的產物，所述DNA條形碼引物為CS217-F:GGACGATAAGACCCTATAAA；CF 217-R:ATTACGCTGTTATCCCTAAA；
(3)進行物種鑒別的序列特征比對，其中，是按下表所示的核苷酸序列特征變異的位點進行物種鑒別；
2.根據權利要求1所述的基于DNA條形碼的海水蟹類物種鑒別方法，其特征在于：步驟(2)所述PCR擴增條件為：94℃預變性2min；94℃變性45s、50℃退火1min、72℃延伸1min，共35個循環；最后72℃延伸10min；反應體系為：12.5μL 2×Taq MasterMix、1μL上游引物(10μmol/L)、1μL下游引物(10μmol/L)、100ng模板DNA，用ddH2O將總體積補足至25μL。
3.一種DNA條形碼引物，其特征在于：所述DNA條形碼引物的核苷酸序列為：
CS 217-F:GGACGATAAGACCCTATAAA(SEQ ID NO：1)；
CF 217-R:ATTACGCTGTTATCCCTAAA(SEQ ID NO：2)。
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