[發明專利]一種發酵薏米富集川芎嗪和溶纖酶功效成分的方法

有效

• 申請號: 201710874661.0
• 申請日: 2017-09-25
• 公開（公告）號: CN107801905B
• 公開（公告）日: 2021-11-16
• 發明（設計）人: 秦禮康;文安燕
• 申請（專利權）人: 貴州大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A23L7/104;A23L33/105;C12R1/125
• 代理公司: 北京化育知識產權代理有限公司 11833
• 代理人: 秦麗

本發明涉及保健食品技術領域，尤其是一種發酵薏米富集川芎嗪和溶纖酶功效成分的方法，采用枯草芽孢桿菌發酵薏米，不僅能夠獲得具有高纖溶活性的纖溶酶，而且還能夠獲得可以作為鈣離子拮抗藥的川芎嗪以及用途廣泛的乙偶姻。與同菌株發酵黃豆中的川芎嗪相比，發酵薏米中川芎嗪含量是黃豆的150倍以上，乙偶姻是其的4倍以上，溶纖酶相當。

技術領域

本發明涉及保健食品技術領域，尤其是一種發酵薏米富集川芎嗪和溶纖酶功效成分的方法。

背景技術

薏米又名薏苡仁或薏仁米，俗稱“藥王米”、“回回米”、“六谷米”，自古以來就是一種聲譽卓著的滋補食品。據化驗分析，薏米含蛋白質高達18-21％、脂肪4-6％、碳水化合物79.2％，還富含多種維生素(尤其是B族維生素)、人體所需的氨基酸及礦物質、薏苡素及薏苡酯等多種活性成分，營養非常豐富。薏米具有消食、利尿、化膿、鎮痛、消腫、潤膚、美容、消除疲勞、預防高血壓及促消化等功效，特別是其中含有的薏苡酯能很好地抑制某些癌細胞的生長。所以薏米是很好的藥食兩用功能性食品原料，正日益成為人們理想的健康營養食品。

川芎嗪(Tetramethylpyrazine，TMP)，又名四甲基吡嗪，最早是從川芎中提取的具有生物活性成分的藥效成分。川芎嗪具有擴張血管、改善微循環及抑制血小板集聚等藥理作用，同時也能抑制腫瘤細胞生長及轉移、調控細胞生長、抑制細胞凋亡，缺血/再灌注損傷保護作用、保護視力及預防白內障、預防糖尿病及并發癥等作用。

溶纖酶(Fibrinolytic Enzyme)是在豆豉發酵過程由枯草桿菌產生的一種絲氨酸蛋白酶，具有明顯溶栓作用和高纖溶活性的激酶，并能刺激靜脈內皮細胞產生纖溶酶原激活劑，從而更有效地發揮溶栓效果。可用于治療和預防血栓病，它可經口服直接溶栓，同時激活體內的纖溶酶原而增加內源性纖溶酶的活性，不僅溶栓能力強，而且無毒副作用。

乙偶姻(Acetoin)是眾多微生物的代謝產物，也是川芎嗪合成的前體物質，可廣泛應用于制藥行業、化工行業等。乙偶姻和川芎嗪可由再生原料發酵產生。1962年，Kos-uge和Kamiya第一次報道利用微生物發酵產生川芎嗪。法國Besson等人利用B.subtilis IFO3013以大豆為培養基固態發酵生產川芎嗪，通過添加適量的乙偶姻，發酵14天后，川芎嗪的產量可達2.5g/kg。

為此，現有技術中，有研究者采用枯草芽孢桿菌發酵大豆合成川芎嗪，得到川芎嗪含量為0.92mg/100g；如專利公開號為CN101503718A。可是，現有技術中，并未有研究者采用枯草芽孢桿菌發酵薏米，富集川芎嗪、溶纖酶等活性成分的研究。

發明內容

為了解決現有技術中存在的上述技術問題，本發明提供一種發酵薏米富集川芎嗪和溶纖酶功效成分的方法，采用枯草芽孢桿菌或納豆芽孢桿菌接種到熟化薏米中發酵，富集川芎嗪和溶纖酶功效成分。

具體是通過以下技術方案得以實現的：

發酵薏米富集川芎嗪和溶纖酶功效成分的方法，包括以下步驟：

(1)將枯草芽孢桿菌菌種活化，并培養，得到種子液；

(2)將種子液接種到熟化薏米中，于37℃恒溫培養3天，得到含有川芎嗪、溶纖酶和乙偶姻的薏米發酵產物。

在上述枯草芽孢桿菌菌種活化是將枯草芽孢桿菌接種到LB斜面培養基上，在37℃恒溫活化培養18-22h；再將其轉接到LB液體培養基中，在180rpm、37℃下，于恒溫恒壓床上培養18-22h；得到種子液，該種子液中，活菌數為10⁶-10⁷cfu/ml。

上述的LB斜面培養基是100mL培養基中，含有0.5g氯化鈉，0.3g牛肉膏，1g蛋白胨，1.5～2g瓊脂，余量為水，pH自然。

上述的LB液體培養基是100mL培養基中，含有0.5g氯化鈉，0.3g牛肉膏，1g蛋白胨，余量為水，pH自然。