[發(fā)明專利]一種發(fā)酵薏米富集川芎嗪和溶纖酶功效成分的方法

有效

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• 申請日: 2017-09-25
• 公開（公告）號: CN107801905B
• 公開（公告）日: 2021-11-16
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 秦禮康;文安燕
• 申請（專利權(quán)）人: 貴州大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A23L7/104;A23L33/105;C12R1/125
• 代理公司: 北京化育知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11833
• 代理人: 秦麗

1.一種發(fā)酵薏米富集川芎嗪和溶纖酶功效成分的方法，其特征在于，采用枯草芽孢桿菌接種到熟化薏米中發(fā)酵，促使川芎嗪和溶纖酶功效成分富集；

所述的發(fā)酵薏米富集川芎嗪和溶纖酶功效成分的方法，包括以下步驟：

（1）將枯草芽孢桿菌菌種活化并培養(yǎng)，得到種子液；所述的種子液，其活菌數(shù)為 1×10⁶ ～1×10⁷ cfu/mL；

（2）將種子液接種到熟化薏米中，于37℃恒溫培養(yǎng)3天，得到含有川芎嗪、溶纖酶和乙偶姻的薏米發(fā)酵產(chǎn)物；

所述的熟化薏米，是將薏米浸泡過夜后，清洗，并加1.5倍蒸餾水后，置于滅菌鍋中，在121℃下蒸煮滅菌處理30min；

（3）將薏米發(fā)酵產(chǎn)物置于離心管中，加入2倍質(zhì)量的生理鹽水，靜置24h，離心，得到含溶纖酶的溶液；或者將薏米發(fā)酵產(chǎn)物迅速冷凍后，干燥，將干燥粉末過60目篩，并加入有機溶劑，超聲提取，離心，去除渣，得到含川芎嗪和乙偶姻的溶液；

所述的有機溶劑，是質(zhì)量濃度為80％的乙醇；

所述的超聲提取是料液質(zhì)量比為1:10，于20-50℃下，超聲提取30min，在8000rpm 下離心處理 15min，重復(fù)提取兩次，即得。

2.一種發(fā)酵薏米富集川芎嗪和溶纖酶功效成分的方法，其特征在于，采用納豆芽孢桿菌接種到熟化薏米中發(fā)酵，促使川芎嗪和溶纖酶功效成分富集；

所述的發(fā)酵薏米富集川芎嗪和溶纖酶功效成分的方法，包括以下步驟：

（1）將納豆芽孢桿菌菌種活化并培養(yǎng)，得到種子液；

所述的種子液，其活菌數(shù)為 1×10⁶ ～1×10⁷cfu/mL；

（2）將種子液接種到熟化薏米中，于37℃恒溫培養(yǎng)3天，得到含有川芎嗪、溶纖酶和乙偶姻的薏米發(fā)酵產(chǎn)物；

所述的熟化薏米，是將薏米浸泡過夜后，清洗，并加1.5倍蒸餾水后，置于滅菌鍋中，在121℃下蒸煮滅菌處理30min；

（3）將薏米發(fā)酵產(chǎn)物置于離心管中，加入2倍質(zhì)量的生理鹽水，靜置24h，離心，得到含溶纖酶的溶液；或者將薏米發(fā)酵產(chǎn)物迅速冷凍后，干燥，將干燥粉末過60目篩，并加入有機溶劑，超聲提取，離心，去除渣，得到含川芎嗪和乙偶姻的溶液；

所述的有機溶劑，是質(zhì)量濃度為 80％的乙醇；

所述的超聲提取是料液質(zhì)量比為1:10，于20-50℃下，超聲提取30min，在8000rpm 下離心處理15min，重復(fù)提取兩次，即得。

3.如權(quán)利要求1所述的發(fā)酵薏米富集川芎嗪和溶纖酶功效成分的方法，其特征在于，所述的菌種活化，是將枯草芽孢桿菌接種于 LB 斜面培養(yǎng)基上，在 37℃恒溫活化培養(yǎng)18-22h。

4.如權(quán)利要求1所述的發(fā)酵薏米富集川芎嗪和溶纖酶功效成分的方法，其特征在于，所述的種子液培養(yǎng)，是將活化后的菌種接種到 LB 液體培養(yǎng)基中，在180rpm、37℃下，于恒溫恒壓床上培養(yǎng)18-22h。

5.如權(quán)利要求3所述的發(fā)酵薏米富集川芎嗪和溶纖酶功效成分的方法，其特征在于，所述的LB斜面培養(yǎng)基是100mL培養(yǎng)基中，含有0.5g氯化鈉，0.3g牛肉膏，1g蛋白胨，1.5～2g瓊脂，余量為水，自然pH。

6.如權(quán)利要求4所述的發(fā)酵薏米富集川芎嗪和溶纖酶功效成分的方法，其特征在于，所述的LB液體培養(yǎng)基是100mL培養(yǎng)基中，含有0.5g氯化鈉，0.3g牛肉膏，1g蛋白胨，余量為水，自然pH。