[發明專利]一種運用電化學發光成像識別技術的生物標志物檢測方法有效
| 申請號: | 201710862223.2 | 申請日: | 2017-09-21 |
| 公開(公告)號: | CN107764803B | 公開(公告)日: | 2021-04-13 |
| 發明(設計)人: | 黃曦;廖玉輝;趙釗艷;譚青琴 | 申請(專利權)人: | 中山大學 |
| 主分類號: | G01N21/76 | 分類號: | G01N21/76;G01N33/53 |
| 代理公司: | 廣州凱東知識產權代理有限公司 44259 | 代理人: | 羅丹 |
| 地址: | 510000 *** | 國省代碼: | 廣東;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 運用 電化學 發光 成像 識別 技術 生物 標志 檢測 方法 | ||
1.一種運用電化學發光成像識別技術的生物標志物檢測方法,其特征在于:
按如下步驟檢測CEA蛋白:
步驟一:
A.首先構建電化學發光放大探針,取線性或樹狀三聯吡啶釕-賴氨酸聚合物及抗體1,按1:1的比例混勻后,37℃孵育6小時,使該聚合物和抗體1充分連接;
B.取待測CEA蛋白即癌胚蛋白CEA樣品1μL,并加入44.5μL超純水中,并加入2.5μL磷酸鹽緩沖液PBS,20X,渦旋震蕩;
C.向步驟B體系中加入所述電化學發光放大探針1μL,濃度為0.25μM,渦旋震蕩,并在37℃情況下孵育15分鐘,使CEA蛋白與電化學發光信號放大探針連接,得到體系1;
D.往體系1中加入1μL標記生物素的捕捉探針,渦旋并充分混勻后37℃孵育15分鐘,使CEA蛋白與捕捉探針連接,得到體系2;
E.往體系2中加入鏈霉親和素磁珠,濃度1mg/mL,充分渦旋混勻后,在37℃情況下孵育10分鐘,使捕捉探針與鏈霉親和素磁珠連接,然后用磁分離器分離,用PBS1X緩沖液沖洗;
步驟二:用超純水混勻步驟一所得產物,然后置于電化學發光成像系統中檢測發光信號。
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