[發明專利]一種防治馬鈴薯枯萎病的菌株及其制劑的制備方法和應用

有效

• 申請號: 201710862006.3
• 申請日: 2017-09-21
• 公開（公告）號: CN107603906B
• 公開（公告）日: 2018-06-01
• 發明（設計）人: 唐廣輝;趙鋼勇;顧欣燕;孫海遠;閆輝敏
• 申請（專利權）人: 天津坤禾生物科技股份有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A01N63/00;A01P3/00;C12R1/125
• 代理公司: 天津市尚文知識產權代理有限公司 12222
• 代理人: 張東浩

本發明涉及一種防治馬鈴薯枯萎病的菌株及其制劑的制備方法和應用，該菌株為枯草芽孢桿菌MES810，保藏日期為2017年8月10日，保藏編號為CGMCCNo.14514。該菌株對應的制劑的制備方法如下：菌種活化；一級種子液的制備；二級種子液的制備：發酵罐發酵，出料得到枯草芽孢桿菌液體制劑。本發明的枯草芽孢桿菌對茄類鐮刀菌、尖孢鐮刀菌、串珠鐮刀菌、雪腐鐮刀菌或接骨木鐮刀菌、燕麥鐮刀菌組成的鐮刀菌屬致病菌有強烈的抑制作用，防止馬鈴薯枯萎病的發生，防治效果達80%以上，促進馬鈴薯增產、增收。本發明微生物菌劑具有無藥害、無殘留、不抑制生長以及用量少、施用方法簡單的特點，這為施用方案多樣化和生態環境的保護提供了可能。

技術領域

本發明屬于農業生物領域，涉及一種防治馬鈴薯枯萎病的菌株及其制劑的制備方法。

背景技術

本發明涉及一種防治馬鈴薯枯萎病的菌株及其菌劑制備方法，屬于利用微生物防治植物土傳病害的技術領域。

馬鈴薯枯萎病是一種毀滅性的土傳性真菌病害，一旦大范圍發病很難根治，可導致馬鈴薯減產20%-30%，嚴重地塊可達50%-80%，甚至絕產。我國是世界上種植馬鈴薯面積最大的國家，且馬鈴薯是僅次于稻、麥、玉米的四大糧食作物之一，馬鈴薯枯萎病是近年來對馬鈴薯造成危害的一種重要真菌性土傳病害，該病發病嚴重時，直接影響馬鈴薯產量及其經濟效益。因此控制馬鈴薯枯萎病的危害已成為生產上急需解決的問題。

馬鈴薯枯萎病是一種由茄類鐮刀菌（Fusarium solani）、尖孢鐮刀菌（F.oxysporum）、串珠鐮刀菌（F.moniliforlle）、雪腐鐮刀菌（F.nivale）或接骨木鐮刀菌（F.sambucinum）、燕麥鐮刀菌（F.avenaceum）組成的鐮刀菌屬致病菌侵染引起的土傳病害。病菌復雜，遺傳變異性大，抗逆性強，防治難度大。目前采用的防治方法主要有傳統方法和施用農藥。傳統方法如與禾本科作物或綠肥作物等進行輪作，施用有機肥，加強水肥管理等，雖可減輕該病害，但無法徹底根治，應用性差。施用甲霜靈、多菌靈等藥劑，施用藥劑在短時期內具有一定效果，但是藥效不持久，且污染環境，危害生態平衡。

利用微生物防治植物土傳病害是最有效的防治措施之一，經檢索，目前尚未發現用枯草芽孢桿菌（B.subtilis）防治馬鈴薯枯萎病的報道。

發明內容

本發明的目的是針對現有技術中的馬鈴薯枯萎病防治的不足，提供一種防治馬鈴薯枯萎病的菌株及其制劑的制備方法。本發明的防治馬鈴薯枯萎病的菌株枯草芽孢桿菌對茄類鐮刀菌（Fusarium solani）、尖孢鐮刀菌（F.oxysporum）、串珠鐮刀菌（F.moniliforlle）、雪腐鐮刀菌（F.nivale）或接骨木鐮刀菌（F.sambucinum）、燕麥鐮刀菌（F.avenaceum）組成的鐮刀菌屬致病菌有強烈的抑制作用，防止馬鈴薯枯萎病的發生，防治效果達80%以上，促進馬鈴薯增產、增收。

一種防治馬鈴薯枯萎病的菌株，該菌株為枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)MES810，保藏在中國普通微生物菌種保藏管理中心，保藏地址是北京市朝陽區北辰西路1號院3號，保藏日期為2017年8月10日，保藏編號為CGMCCNo.14514。

該枯草芽孢桿菌細胞桿狀，革蘭氏染色陽性，大小為0.6-0.8μm*2.0-3.5μm,芽孢中生，橢圓形，芽孢囊不膨大。在肉湯培養基上，48h菌落圓形，邊緣不整齊，表面干燥，扁平，白色。陽性反應：接觸酶；氧化酶；水解淀粉。陰性反應：厭氧生長，卵磷脂酶；丙酸鹽利用，乳糖發酵產酸。

采用特異引物進行多重PCR擴增，該菌株產生唯一的擴增產物，條帶大小與枯草芽孢桿菌（Bacillus subtilis）相同。