[發(fā)明專利]一種檢測(cè)CA50的診斷試劑盒及其制備方法

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201710861825.6
• 申請(qǐng)日: 2017-09-21
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN109541200A
• 公開(kāi)（公告）日: 2019-03-29
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 李楠;張巍;黃加喜
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 蘇州新波生物技術(shù)有限公司
• 主分類號(hào): G01N33/535
• 分類號(hào): G01N33/535;G01N33/533
• 代理公司: 上海申新律師事務(wù)所 31272
• 代理人: 竺路玲

1.一種檢測(cè)CA50的診斷試劑盒，包括包被反應(yīng)板，其特征在于，還包括鑭系元素離子標(biāo)記的抗CA50單抗；所述包被反應(yīng)板為吸附有抗CA50單抗的微孔板。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于，還包括校準(zhǔn)品、緩沖液、洗滌液、熒光增強(qiáng)液。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述鑭系元素離子為Eu³⁺、Tb³⁺、Sm³⁺、Dy³⁺中的至少一種。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的試劑盒，其特征在于，所述鑭系元素離子為Eu³⁺。

5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的試劑盒，其特征在于，所述熒光增強(qiáng)液含有β-二酮類化合物或芳香胺類化合物。

6.一種制備如權(quán)利要求1所述的試劑盒的方法，其特征在于，包括下述步驟：

步驟1：制備預(yù)處理包被反應(yīng)板

使用黑色聚苯乙烯制備板架，預(yù)留與酶標(biāo)板相互配合的通孔；酶標(biāo)板經(jīng)過(guò)鈷60輻照30天后，與板架配合組裝，獲得預(yù)處理包被反應(yīng)板，備用；

步驟2：包被板的獲得

用碳酸鹽緩沖液將抗CA50單抗稀釋至1-4μg/mL，以100μL/孔包被過(guò)夜，然后洗滌、封閉、干燥，將微孔板真空密封于鋁箔袋內(nèi)，冷藏備用；

步驟3：制備鑭系元素離子標(biāo)記的抗CA50單抗

抗CA50單抗經(jīng)碳酸鹽緩沖液透析后，與鑭系元素離子按2:1比例混合，靜置24-48小時(shí)，用Sephadex S-200分離柱純化，得到鑭系元素離子標(biāo)記的抗CA50單抗，用保存液將上述鑭系元素離子標(biāo)記的抗CA50單抗保存?zhèn)溆茫?/p>

步驟4：熒光增強(qiáng)液的配制

以無(wú)水乙醇溶解β-NTA、TOPO，再加入令苯二甲酸氫鉀和三蒸水，40℃溶解后，加入乙酸、Ttiton X-100，調(diào)PH至3.2，定容后保存?zhèn)溆茫?/p>

步驟5：組裝各個(gè)組分，獲得檢測(cè)CA50的診斷試劑盒。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法，其特征在于，所述鑭系元素離子為Eu³⁺。