[發明專利]一種檢測CA72-4的診斷試劑盒及其制備方法在審
| 申請號： | 201710861814.8 | 申請日： | 2017-09-21 |
| 公開（公告）號： | CN109541207A | 公開（公告）日： | 2019-03-29 |
| 發明（設計）人： | 張巍;李楠;黃加喜 | 申請（專利權）人： | 蘇州新波生物技術有限公司 |
| 主分類號： | G01N33/574 | 分類號： | G01N33/574;G01N33/533;G01N33/535;G01N21/64 |
| 代理公司： | 上海申新律師事務所 31272 | 代理人： | 竺路玲 |
| 地址： | 215400 江蘇省蘇*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 診斷試劑盒 種檢測 免疫吸附試驗 時間分辨免疫 雙抗體夾心法 消化道腫瘤 定量檢測 輔助診斷 糖類抗原 特異性強 熒光技術 治療效果 靈敏度 卵巢癌 試劑盒 制備 自動化 監測 檢測 | ||
1.一種檢測CA72-4的診斷試劑盒，包括包被反應板，其特征在于，還包括生物素標記的抗CA72-4單抗，鑭系元素離子標記的抗生物素抗體；包被反應板為吸附有抗CA72-4單抗的微孔板。
2.根據權利要求1所述的試劑盒，其特征在于，還包括校準品、緩沖液、洗滌液、熒光增強液。
3.根據權利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述鑭系元素離子為Eu3+、Tb3+、Sm3+、Dy3+中的至少一種。
4.根據權利要求3所述的試劑盒，其特征在于，所述鑭系元素離子為Eu3+。
5.根據權利要求2所述的試劑盒，其特征在于，所述熒光增強液含有β-二酮類化合物或芳香胺類化合物。
6.一種制備如權利要求1所述的試劑盒的方法，其特征在于，包括下述步驟：
步驟1：制備預處理包被反應板
使用黑色聚苯乙烯制備板架，預留與酶標板相互配合的通孔；酶標板經過鈷60輻照30天后，與板架配合組裝，獲得預處理包被反應板，備用；
步驟2：包被板的獲得
用碳酸鹽緩沖液將抗CA72-4單抗稀釋至1-4μg/mL，以100μL/孔包被過夜，然后洗滌、封閉、干燥，將微孔板真空密封于鋁箔袋內，冷藏備用；
步驟3：制備生物素標記的抗CA72-4單抗
抗CA72-4單抗經磷酸鹽緩沖液透析后，與生物素按20:1比例混合，靜置1-2小時，得到生物素標記的抗CA72-4單抗，用保存液將上述生物素標記的抗CA72-4單抗保存備用；
步驟4：制備鑭系元素離子標記的抗生物素抗體
抗生物素抗體經碳酸鹽緩沖液透析后，與鑭系元素離子按2:1比例混合，靜置24-48小時，用Sephadex S-200分離柱純化，得到鑭系元素離子標記的抗生物素抗體，用保存液將上述鑭系元素離子標記的抗生物素抗體保存備用；
步驟5：熒光增強液的配制
以無水乙醇溶解β-NTA、TOPO，再加入令苯二甲酸氫鉀和三蒸水，40℃溶解后，加入乙酸、Ttiton X-100，調PH至3.2，定容后保存備用；
步驟6：組裝各個組分，獲得檢測CA72-4的診斷試劑盒。
7.根據權利要求6所述的方法，其特征在于，所述鑭系元素離子為Eu3+。
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