[發明專利]人脂肪間充質干細胞抗肝纖維化注射液及其制備方法

在審

• 申請號: 201710847611.3
• 申請日: 2017-09-19
• 公開（公告）號: CN107496456A
• 公開（公告）日: 2017-12-22
• 發明（設計）人: 張炳強
• 申請（專利權）人: 青島瑞思德生物科技有限公司
• 主分類號: A61K35/28
• 分類號: A61K35/28;A61K9/08;A61K47/46;A61K47/36;A61K47/42;A61K47/22;A61K47/28;A61K47/02;A61P1/16
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[技術領域]

本發明屬于生物學技術領域，尤其涉及一種人脂肪間充質干細胞抗肝纖維化注射液及其制備方法。

背景技術]

脂肪組織中含有一類具有多向分化潛力的細胞，即脂肪間充質干細胞，簡稱脂肪干細胞。其生物學性質與骨髓間充質干細胞相類似，并可向脂肪、骨、軟骨、肝、肌肉、內皮、造血、胰島和神經等多種細胞方向分化。

脂肪間充質干細胞有一下優勢：1、脂肪組織在體內分布廣泛，儲量豐富。且脂肪組織取材容易，吸脂手術屬于技術成熟的常規手術，手術風險小，患者痛苦少，這一點尤其利于臨床應用；2、脂肪干細胞的獲取效率要優于骨髓間充質干細胞。 細胞克隆形成實驗表明，間充質干細胞只占到成人骨髓的(0.2-1)×10^-5。而脂肪組織經膠原酶消化后，其中主要的細胞 類型脂肪細胞，很容易通過浮力而去掉，所獲得的細胞克隆形成率是骨髓間充質干細胞的100-500倍；3、從臨床角度出發，在短時間內更容易獲得大量的脂肪干細胞，對于急性疾病的快速治療具有重要意義。一次吸脂手術可獲得超過200ml的脂肪組織，且每100ml都能獲得大約2×10⁸個有核細胞，其中含有大約1.2×10⁸的干細胞，相當于相同體積骨髓的2000倍。

由于脂肪組織在人體內儲量豐富，獲取簡便創傷小，在組織工程、器官修復、基因治療等方面都有著廣闊的應用前景，因此脂肪間充質干細胞已成為繼骨髓間充質干細胞后干細胞領域另一個備受關注的熱點。

2012年1月，韓國FDA批準的自體脂肪干細胞藥物Cuepistem成功上市，用于治療復雜性克隆氏病并發肛瘺。同年10月，美國FDA批準了Cytori Therapeutics公司脂肪干細胞對心臟衰竭患者有效性的臨床試驗。

肝纖維化(fibrosis of liver)是多種原因引起的慢性肝損害所致的病理改變，表現為肝內細胞外間質成分過度異常地沉積，并影響肝臟的功能，是慢性肝病發展到肝硬化必經之階段。引起肝纖維化的病因很多，在國內以病毒性肝炎， 尤其是慢性乙型和丙型肝炎所致的肝纖維化最為常見。

在我國，乙型肝炎病毒表面抗原的檢出率約為10％，其中慢性無癥狀乙型肝炎病毒感染者或慢性無癥狀HBV攜帶者就超過1.3億，現慢性乙肝患者約3000萬人。慢性感染患者中 40％可能發生肝硬化或者肝癌，是正常人群的100-200倍。肝纖維化的治療成為現今人們關注的焦點。

現代醫學并無治療肝纖維化的特異性藥物，多采用休息、加強營養、補充維生素等對癥治療方式，嚴重者需被 迫停止用藥，以免加重肝纖維化。盡管中醫藥對肝纖維化有一定的促再生和修 復作用，但效果仍不是十分理想。

目前也有利用干細胞移植的方法治療肝纖維化，但多采用臍帶間充質干細胞或者骨髓間充質干細胞，細胞來源有限。且輸注前細胞處理過程比較簡單，不能保證使用過程中細胞的穩定性，不能較長時間保持細胞活性，因此不適于遠距離運輸。且間充質干細胞表面表達多種黏附分子，主要參與細胞-細胞，細胞-基質之間的特異性粘連過程，影響細胞遷移。因此，在干細胞輸注過程中極易促使細胞聚集成團，形成細胞栓，增加了間充質干細胞臨床治療的危險性。發明專利號201010551722.8的發明專利，公布了一種人臍帶間充質干細胞抗肝纖維化注射液，由10%-50%人血白蛋白原液和49.5%-89.5%的勃脈力A液、0.5%肝素鈣組成，24h后干細胞活率保存在90%以上。但對于更容易獲取的人脂肪間充質干細胞，如何運用于抗肝纖維化治療，是現階段技術人員急需解決的問題。

發明內容]

本發明的目的是為了克服現有技術的不足，提供一種人脂肪間充質干細胞抗肝纖維化注射液及其制備方法，其具有穩定性高、療效好、安全性高、便于儲存和運輸，適應臨床大規模使用，應用前景廣闊的特點，本發明可為肝纖維化患者帶來福音，為臨床上干細胞的使用開辟了新的道路。

本發明提供的人脂肪間充質干細胞抗肝纖維化注射液，由人脂肪間充質干細胞保存液和人脂肪間充質干細胞構成；所述的人脂肪間充質干細胞保存液由30%-45%的復方電解質注射液、30-45%羥乙基淀粉200/0.5氯化鈉注射液、2%-8%人血白蛋白注射液、2%-5%大株紅景天注射液、2%-5%的香菇多糖注射液、2%-5%的黃芪注射液、2%-5%的香丹注射液、2%-5%胎盤多肽注射液、1%-3%維生素C注射液、0.5%-1.5%地塞米松磷酸鈉注射液組成；每毫升人脂肪間充質干細胞保存液中含有人脂肪間充質干細胞1×10⁵～5×10⁶個。