[發明專利]一種分泌抗赭曲霉毒素單克隆抗體的雜交瘤細胞株及其應用有效
| 申請號: | 201710844559.6 | 申請日: | 2017-09-19 |
| 公開(公告)號: | CN107513522B | 公開(公告)日: | 2020-04-28 |
| 發明(設計)人: | 何方洋;洪小栩;萬宇平;崔廷婷;袁媛;曹東山;南鐵貴;趙正苗 | 申請(專利權)人: | 北京勤邦生物技術有限公司 |
| 主分類號: | C12N5/20 | 分類號: | C12N5/20;C07K16/14;G01N33/577 |
| 代理公司: | 暫無信息 | 代理人: | 暫無信息 |
| 地址: | 102206 北京市昌平*** | 國省代碼: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 分泌 曲霉 毒素 單克隆抗體 雜交瘤 細胞株 及其 應用 | ||
1.一種分泌抗赭曲霉毒素單克隆抗體的雜交瘤細胞株,命名為赭曲霉毒素單克隆抗體雜交瘤細胞株F-3-3,已保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心,保藏編號為CGMCC No.14303,保藏日期為2017年06月15日,其特征在于:所述雜交瘤細胞株是通過OTA半抗原與牛血清白蛋白偶聯得到免疫抗原后免疫小鼠制備并篩選得到的;所述OTA半抗原的合成方法為:取8-羥基-3-甲基-1-氧代苯并吡喃-7-羧酸0.5g,加20mL二氯甲烷溶解,取草酰氯0.31g,加0.5mL N,N-二甲基甲酰胺溶解稀釋,滴加到二氯甲烷溶液中,室溫攪拌2h,加入4-硝基苯丙氨酸0.52g,加三乙胺0.3mL,室溫攪拌2h,停止反應,加水20mL,震蕩靜置,分出水相,有機相濃縮蒸干,上硅膠柱,體積比為1/5的乙酸乙酯/石油醚洗脫分離,得到硝基赭曲霉素0.87g;取硝基赭曲霉素0.87g,加乙醇50mL溶解,加鈀碳0.2g,通入氫氣,室溫攪拌4h,停止反應,過濾,除去鈀碳,旋蒸除去乙醇,得到紅色油狀物,30mL體積比為1/1的二氯甲烷/石油醚重結晶,得到氨基赭曲霉素0.76g,即為OTA半抗原。
2.一種抗赭曲霉毒素單克隆抗體,其特征在于:它是由權利要求1所述保藏編號為CGMCC No.14303的赭曲霉毒素單克隆抗體雜交瘤細胞株F-3-3分泌產生的。
3.權利要求2所述抗赭曲霉毒素單克隆抗體的應用,其特征在于:用于中藥中赭曲霉毒素A的分析檢測。
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