[發明專利]一種耐氧化低溫葡萄糖氧化酶及其生產方法與應用有效
| 申請號: | 201710838183.8 | 申請日: | 2017-09-18 |
| 公開(公告)號: | CN107488640B | 公開(公告)日: | 2020-09-25 |
| 發明(設計)人: | 王興吉;賈仁潔;錢娟娟;郭慶文;張杰 | 申請(專利權)人: | 山東隆科特酶制劑有限公司 |
| 主分類號: | C12N9/04 | 分類號: | C12N9/04;C12N1/14;C12R1/685 |
| 代理公司: | 北京瑞盛銘杰知識產權代理事務所(普通合伙) 11617 | 代理人: | 栗華楠 |
| 地址: | 276400 *** | 國省代碼: | 山東;37 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 氧化 低溫 葡萄糖 氧化酶 及其 生產 方法 應用 | ||
1.一種耐氧化低溫葡萄糖氧化酶,其特征在于,所述葡萄糖氧化酶產自黑曲霉,具體為黑曲霉(Aspergillu niger)CH870,保藏編號為CGMCC No.14138;
所述葡萄糖氧化酶的制備方法,具體如下:
以黑曲霉(Aspergillu niger)CH870為生產菌種;
(1)種子罐培養:
罐壓0.05-0.08MPa,培養溫度30℃,通風量30m3/h,攪拌轉速180r/min,pH控制7.0;培養至菌體染色深、粗壯,無雜菌,結束培養;
(2)發酵罐培養
罐壓0.05-0.08Mpa,培養溫度30℃,攪拌轉速300r/min,pH控制6.5-7.0;通風量:0-40h為30m3/h,40-58h為45m3/h,58h-放罐為40m3/h;當pH升至7.0時,開始補料,控制pH在6.5-7.0;
(3)放罐
發酵罐培養至96-110h,酶活增長緩慢,菌體開始部分自溶,即可放罐;
(4)葡萄糖氧化酶的提取
發酵液-預處理-壓濾-超濾-標準化-精濾-調配-灌裝-檢測-成品;
所述預處理,是放罐后,調節發酵液pH至4.0左右,按照發酵液的體積依次加入2%苯甲酸鈉,3%膨潤土,4%珍珠巖,最后加入發酵液的1倍體積的水;
所述調配,是指按產品規格的要求,進行酶活力的調配。
2.如權利要求1所述的葡萄糖氧化酶的方法,其特征在于,
種子罐培養基:葡萄糖20%,蛋白胨25%,(NH4)2SO4 5%,K2HPO4 1%,MgSO4·7H2O0.5%,pH 7.0;
發酵培養基:蔗糖12.30%、蛋白胨0.41%、NaNO3 0.6%、KH2PO4 0.2%、KCl 0.05%、MgSO4·7H2O 0.07%、CaCO31%,pH 7.0;
補料培養基:蔗糖20%,玉米漿30%,氯化鈣0.5%,pH 7.0。
3.權利要求1所述葡萄糖氧化酶在醫學、食品、飼料領域的非治療目的的應用。
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