[發(fā)明專利]一種耐氧化低溫葡萄糖氧化酶及其生產(chǎn)方法與應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201710838183.8
• 申請(qǐng)日: 2017-09-18
• 公開（公告）號(hào): CN107488640B
• 公開（公告）日: 2020-09-25
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王興吉;賈仁潔;錢娟娟;郭慶文;張杰
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 山東隆科特酶制劑有限公司
• 主分類號(hào): C12N9/04
• 分類號(hào): C12N9/04;C12N1/14;C12R1/685
• 代理公司: 北京瑞盛銘杰知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11617
• 代理人: 栗華楠

1.一種耐氧化低溫葡萄糖氧化酶，其特征在于，所述葡萄糖氧化酶產(chǎn)自黑曲霉，具體為黑曲霉(Aspergillu niger)CH870，保藏編號(hào)為CGMCC No.14138；

所述葡萄糖氧化酶的制備方法，具體如下：

以黑曲霉(Aspergillu niger)CH870為生產(chǎn)菌種；

(1)種子罐培養(yǎng)：

罐壓0.05-0.08MPa，培養(yǎng)溫度30℃，通風(fēng)量30m³/h，攪拌轉(zhuǎn)速180r/min，pH控制7.0；培養(yǎng)至菌體染色深、粗壯，無雜菌，結(jié)束培養(yǎng)；

(2)發(fā)酵罐培養(yǎng)

罐壓0.05-0.08Mpa，培養(yǎng)溫度30℃，攪拌轉(zhuǎn)速300r/min，pH控制6.5-7.0；通風(fēng)量：0-40h為30m³/h，40-58h為45m³/h，58h-放罐為40m³/h；當(dāng)pH升至7.0時(shí)，開始補(bǔ)料，控制pH在6.5-7.0；

(3)放罐

發(fā)酵罐培養(yǎng)至96-110h，酶活增長(zhǎng)緩慢，菌體開始部分自溶，即可放罐；

(4)葡萄糖氧化酶的提取

發(fā)酵液-預(yù)處理-壓濾-超濾-標(biāo)準(zhǔn)化-精濾-調(diào)配-灌裝-檢測(cè)-成品；

所述預(yù)處理，是放罐后，調(diào)節(jié)發(fā)酵液pH至4.0左右，按照發(fā)酵液的體積依次加入2％苯甲酸鈉，3％膨潤(rùn)土，4％珍珠巖，最后加入發(fā)酵液的1倍體積的水；

所述調(diào)配，是指按產(chǎn)品規(guī)格的要求，進(jìn)行酶活力的調(diào)配。

2.如權(quán)利要求1所述的葡萄糖氧化酶的方法，其特征在于，

種子罐培養(yǎng)基：葡萄糖20％，蛋白胨25％，(NH₄)₂SO₄ 5％，K₂HPO₄ 1％，MgSO₄·7H₂O0.5％，pH 7.0；

發(fā)酵培養(yǎng)基：蔗糖12.30％、蛋白胨0.41％、NaNO₃ 0.6％、KH₂PO₄ 0.2％、KCl 0.05％、MgSO₄·7H₂O 0.07％、CaCO₃1％，pH 7.0；

補(bǔ)料培養(yǎng)基：蔗糖20％，玉米漿30％，氯化鈣0.5％，pH 7.0。

3.權(quán)利要求1所述葡萄糖氧化酶在醫(yī)學(xué)、食品、飼料領(lǐng)域的非治療目的的應(yīng)用。