[發明專利]一種加拿大糖槭組織培養快繁的方法

有效

• 申請號: 201710835544.3
• 申請日: 2017-09-15
• 公開（公告）號: CN107455261B
• 公開（公告）日: 2019-08-13
• 發明（設計）人: 傅松玲;朱瑩瑩;熊智慧;郭媛;王兆成;任媛;王敬楠
• 申請（專利權）人: 安徽農業大學
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 合肥鼎途知識產權代理事務所(普通合伙) 34122
• 代理人: 葉丹

本發明公開了一種加拿大糖槭組織培養快繁的方法，屬于木本植物組織培養繁育技術領域。本發明包含外植體選擇、外植體預處理、無菌體系的建立、誘導培養、增殖培養、生根培養、煉苗馴化等步驟。利用植物的組織器官，在無菌體系條件下，通過人工控制外界環境條件進行培養，達到快速繁殖苗木的目的，有效保持優良母本的穩定性狀。與常規的扦插及嫁接無性繁殖技術相比，本技術取材量小，避免了自然條件的制約，繁殖系數高達5?20倍，更適用于新引種植物，解決因其資源不足，造成的繁殖和推廣問題。

技術領域

本發明涉及一種加拿大糖槭組織培養快繁的方法，屬于木本植物組織培養繁育技術領域。

背景技術

加拿大糖槭樹形極其優美，葉形別致，入秋后，葉色開始慢慢由綠變為黃色、橙黃色、彩色、深紅等色彩，是世界著名的彩葉觀賞樹木。此外，它也是三大糖料木本植物之一，樹液中含有3-10％左右的楓糖，一般胸徑15cm以上的糖槭樹可以開始鉆孔采割糖液，連續采集時間至少50年，被譽為“鐵桿甘蔗”。其木材作為硬楓木的一種，木質堅硬強韌、密度大、紋理細密，具有極高的抗磨擦強度及抗蒸汽彎曲性能，為“先割糖，后用材”的理想經濟樹種。加拿大糖槭作為新型經濟林樹木、景觀觀賞樹種和用材樹種開始在我國各省市初步推廣，這對于豐富我國林業資源，帶動林業經濟發展具有重大意義。

加拿大糖槭引種于我國年限較短，目前國內對加拿大糖槭的快速繁殖與產業化經營研究尚屬空白。對于其引種栽培和應用推廣的研究尚處于起步階段。加拿大糖槭生長速度較為緩慢，10年生樹一般5m，10-15年開始開花，20年生以上樹開始大量結實。目前我國加拿大糖槭種質資源全部依賴于進口，價格昂貴且檢疫程序復雜。繁殖方式以傳統的播種育苗為主，催芽方法復雜、周期長，出芽率約為70％左右，新引種植物易受自然環境條件影響，得苗率僅為50％。研究表明，加拿大糖槭依靠種子繁殖的實生苗變異較大，色彩性狀穩定性不高，因此很難在種苗市場上廣泛推廣應用。

無性繁殖包括扦插繁殖、嫁接繁殖和組織培養。對加拿大糖槭而言，扦插及嫁接繁殖還在試驗中，扦插成活率僅為30％，嫁接成活率5％，受地域、溫度等自然環境影響較大，尤其難以適應我國南方夏季高溫濕熱的自然環境，目前尚未探索出穩定的方法；繁殖系數不高且國內沒有大量成樹提供充足的繁殖材料，對大面積規模繁殖提供一定局限性。加拿大糖槭的組織培養方面在國內外尚鮮見報道，但木本組織培養技術已經較為成熟，其取材方便，生長環境可控，繁殖系數高，遺傳穩定性好的優點越來越應用于現代育苗中。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是提供一種加拿大糖槭組織培養快繁的方法，旨在利用植物的組織器官，在無菌體系條件下，通過人工控制外界環境條件進行培養，達到快速繁殖苗木的目的。此技術取材方便，生長環境可控，繁殖系數高，遺傳穩定性好，解決了引種初期加拿大糖槭資源的不足，對加拿大糖槭的穩定繁殖和推廣利用都具有著非常重要的意義。

為解決上述技術問題，本發明所采取的技術方案是：一種加拿大糖槭組織培養快繁的方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)外植體選擇

選取多年生健壯、無病蟲害的加拿大糖槭，以其當年生、未木質化的嫩枝作為外植體；

(2)外植體預處理

將步驟(1)中的外植體除去葉片、葉柄，75％酒精擦拭后，修剪成至少帶一個腋芽或頂芽的莖段，然后洗潔精震蕩清洗；接著將莖段浸泡在純水中并置于溫度為18-22℃下的超聲波清洗器中處理，之后用純水沖洗；

(3)無菌體系的建立

將經步驟(2)處理后外植體在無菌操作臺中用75％酒精浸泡消毒，用無菌水沖洗，用0.1％氯化汞震蕩消毒，用無菌水沖洗，吸干，再切除莖段兩端消毒死亡部分后獲得無菌材料；

(4)誘導培養