[發明專利]一種復合檢測抗原及其應用

在審

• 申請號: 201710835257.2
• 申請日: 2017-09-15
• 公開（公告）號: CN107632162A
• 公開（公告）日: 2018-01-26
• 發明（設計）人: 黃小燕;楊翔;李楊;茹志偉;樓建榮;周單
• 申請（專利權）人: 廣州市雷德生物科技有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68
• 代理公司: 北京品源專利代理有限公司11332
• 代理人: 鞏克棟

1.一種復合檢測抗原，其特征在于，所述檢測抗原為瓜氨酸化蛋白和氨甲酰化蛋白的組合抗原。

2.根據權利要求1所述的檢測抗原，其特征在于，所述瓜氨酸化蛋白和氨甲酰化蛋白的質量比為(5-8):(2-5)，優選為8:2；

優選地，所述組合抗原的工作濃度為1-20μg/mL，優選為2-10μg/mL。

3.根據權利要求1或2所述的檢測抗原，其特征在于，所述瓜氨酸化蛋白為瓜氨酸化纖維蛋白原、瓜氨酸化波形蛋白、瓜氨酸化II型膠原、瓜氨酸化核周因子、瓜氨酸化絲聚蛋白、瓜氨酸化牛白蛋白、瓜氨酸化組胺受體、瓜氨酸化α-抗胰蛋白酶、瓜氨酸化動力蛋白重鏈3、瓜氨酸化纖維蛋白原β鏈、瓜氨酸化角蛋白、瓜氨酸化微管蛋白β鏈、瓜氨酸化纖維蛋白、瓜氨酸化纖維粘連蛋白、瓜氨酸化可溶性人白細胞抗原I、瓜氨酸化α-烯醇化酶烯醇化酶、瓜氨酸化無孢蛋白、瓜氨酸化組織蛋白酶D、瓜氨酸化β-肌動蛋白、瓜氨酸化CapZa-1、瓜氨酸化蛋白質二硫鍵異構酶ER60前體、瓜氨酸化線粒體乙醛脫氫酶或瓜氨酸化Spα受體中的任意一種或至少兩種的組合，優選為瓜氨酸化纖維蛋白原、瓜氨酸化波形蛋白，瓜氨酸化α-烯醇化酶烯醇化酶，瓜氨酸化絲聚蛋白中的任意一種或兩種的組合；

優選地，所述氨甲酰化蛋白為氨甲酰化牛白蛋白、氨甲酰化纖維蛋白原、氨甲酰化波形蛋白、氨甲酰化膠原蛋白或氨甲酰化烯醇酶中的任意一種或至少兩種的組合，優選為氨甲酰化牛白蛋白，氨甲酰化纖維蛋白原、氨甲酰化烯醇酶中的任意一種或至少兩種的組合。

4.根據權利要求1-3中任一項所述的檢測抗原在制備類風濕關節炎的檢測試劑或檢測工具中的應用；

優選地，所述檢測工具為檢測試劑盒。

5.一種檢測類風濕關節炎的檢測試劑盒，其特征在于，包括如權利要求1-3中任一項所述的檢測抗原和檢測中可接受的試劑。

6.根據權利要求5所述的檢測試劑盒，其特征在于，所述檢測抗原固定于固相載體上；

優選地，所述固定方法包括直接包被法和/或間接包被法；

優選地，所述間接包被法為通過生物素與鏈霉親和素的特異性反應將抗原間接固定于固相載體上；

優選地，所述固相載體為酶標板、磁珠、親和膜或液相芯片中的任意一種或至少兩種的組合。

7.根據權利要求5或6所述的檢測試劑盒，其特征在于，所述試劑盒還包括酶標抗人抗體、陰性對照品、陽性對照品、臨界對照品、樣品稀釋液、封閉液、洗滌液、底物溶液和終止液；

優選地，所述酶標抗人抗體的稀釋倍數為1000-10000，優選為5000；

優選地，所述酶標抗人抗體的工作質量濃度為0.1-1μg/mL。

8.根據權利要求6-8中任一項所述的檢測試劑盒的使用方法，其特征在于，包括如下步驟：

(1)試劑盒在室溫平衡0.5-1h，用樣品稀釋液將待測樣品進行稀釋；

(2)在酶標板相對應的孔中加入已稀釋好的待測樣品、陰性對照品和陽性對照品，封板，進行孵育、洗滌；

(3)將酶標抗人抗體加入酶標板中，封板，孵育、洗滌、顯色，檢測所述待測樣品的光吸收值和所述陰性對照品的光吸收值，待測樣品的光吸收值減去陰性對照的光吸收值，為所述待測樣品的結果。

9.根據權利要求8所述的使用方法，其特征在于，步驟(3)所述檢測的波長為450nm和630nm雙波長檢測；

優選地，步驟(3)所述待測樣品的光吸收值減去所述陰性對照品的光吸收值。

10.根據權利要求8或9所述的使用方法，其特征在于，所述待測樣品的結果判定為：

所述待測樣品的光吸收值/所述臨界對照品的光吸收值≥1時，判為陽性；

所述待測樣品的光吸收值/所述臨界對照品的光吸收值＜1時，判為陰性。