[發明專利]一種使用深共融溶劑提取測定瑪咖中5種瑪咖酰胺的方法

有效

• 申請號: 201710824961.8
• 申請日: 2017-09-14
• 公開（公告）號: CN107748211B
• 公開（公告）日: 2020-05-19
• 發明（設計）人: 李珂珂;弓曉杰;陳書笑
• 申請（專利權）人: 大連大學
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 大連智高專利事務所(特殊普通合伙) 21235
• 代理人: 胡景波

本發明具體涉及一種使用深共融溶劑提取測定瑪咖中5種瑪咖酰胺的方法，屬于分析化學技術領域。其技術要點主要包括以下幾個步驟：深共融溶劑的制備、待測溶液的制備、對照品混合液的制備、標準曲線的建立、待測樣品中瑪咖酰胺含量的測定。本發明的提取方法使用的深共融溶劑有較好的化學穩定性、可設計性和可循環使用，原料廉價易得且綠色環保，合成工藝簡單并且不需要引入其它有機溶劑就可獲得高純度的產物，原子經濟性達100％，解決了傳統提取方法有機溶劑毒性大、提取率低、成本高、提取時間較長、提取次數多的問題。

技術領域

本發明屬于綠色提取分離技術領域，具體涉及一種使用深共融溶劑提取測定瑪咖中5種瑪咖酰胺的方法。

背景技術

瑪咖(Lepidiummeyenii)為十字花科獨行菜屬的一種一年生草本植物，最早生長在海拔超過4000米的秘魯中央的安第斯山區，具有2000年的食用歷史。瑪咖的根莖部分比地上部分具有更高的營養價值，根形似小圓蘿卜，外形顏色有紫、黑、黃等。研究表明瑪咖具有豐富的營養價值和藥用價值，瑪咖還具有許多傳統的療效，如作為瀉藥、治療風濕病、呼吸道疾病、痛經及女性更年期綜合征等。另外，瑪咖還具有改善性功能、提高人畜生育能力、緩解疲勞及抗氧化等功能。基于以上特點，瑪咖被稱為“秘魯人參”。瑪咖中的瑪咖酰胺被視為主要的活性功能成分，是評價瑪咖質量的重要標準。

目前對提取瑪咖酰胺的溶劑很多，但都是有機化合物，對人體危害大、對環境污染較嚴重。而深共融溶劑有較好的化學穩定性、可設計性和可循環使用等優點，與有機溶劑相比還具有原料廉價易得且綠色環保，合成工藝簡單并且不需要引入其它有機溶劑就可獲得高純度的產物，原子經濟性達100％。目前用深共融溶劑(DESs)提取中藥中有效成分的方法已有報道，但是用DESs提取瑪咖中瑪咖酰胺的報道還沒有出現。

發明內容

為彌補現有技術的不足，本發明提供的采用DESs做提取劑提取瑪咖中5種瑪咖酰胺并用HPLC測定其含量的方法，提取含量比石油醚高，并且簡便快捷，有較好的化學穩定性、可設計性和可循環使用等優點，是一種分析瑪咖酰胺類成分的有效途徑，有望替代有機溶劑來提取瑪咖中瑪咖酰胺。

本發明的技術方案如下：一種使用深共融溶劑提取測定瑪咖中5種瑪咖酰胺的方法，包括以下步驟：

(1)深共融溶劑的制備

氯化膽堿經真空干燥12h后，按照摩爾比為1:2分別稱取氯化膽堿和1,6-己二醇置于圓底燒瓶中，在80℃下加熱回流攪拌直到形成均勻的液體，然后再反應4個小時即得到無色透明的深共融溶劑；

(2)待測溶液的制備

將瑪咖粉末按照1g:10mL料液比加入含30wt％水的深共融溶劑中，70℃下超聲波提取30min，離心后上清液即為提取液；將提取液溶解于甲醇中得到待測溶液，其中提取液的體積濃度為10％；

(3)對照品混合液的制備

分別精密稱取N-(間-甲氧基芐基)-亞麻酰胺、N-芐基亞麻酰胺、N-(間甲氧基芐基)-亞油酰胺、N-芐基亞油酰胺、N-芐基十六烷酰胺對照品，用甲醇分別溶解后混合，配制成多組對照品混合液，所述對照品混合液中各對照品的質量濃度介于0.5～2000μg/mL范圍內；

(4)標準曲線的建立

分別吸取步驟(3)中多組對照品混合溶液，進行液相色譜測定；

色譜條件如下：色譜柱為XtimateXB-C18色譜柱4.6×250mm，5μm；流動相：流動相A為水，流動相B為乙腈；梯度：0～24min，80vt％流動相B～100vt％流動相B；檢測器為G4212-60008二極管陣列檢測器，檢測波長210nm、280nm；流速0.8mL/min；柱溫40℃；進樣量10μL；

以步驟(3)中各對照品混合液的質量濃度為橫坐標，峰面積為縱坐標做標準曲線；