[發明專利]一種使用深共融溶劑提取測定瑪咖中5種瑪咖酰胺的方法

有效

• 申請號: 201710824961.8
• 申請日: 2017-09-14
• 公開（公告）號: CN107748211B
• 公開（公告）日: 2020-05-19
• 發明（設計）人: 李珂珂;弓曉杰;陳書笑
• 申請（專利權）人: 大連大學
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 大連智高專利事務所(特殊普通合伙) 21235
• 代理人: 胡景波

1.一種使用深共融溶劑提取測定瑪咖中5種瑪咖酰胺的方法，其特征在于，包括以下步驟：

（1）深共融溶劑的制備

氯化膽堿經真空干燥12h后，按照摩爾比為1:2分別稱取氯化膽堿和1,6-己二醇置于圓底燒瓶中，在80℃下加熱回流攪拌直到形成均勻的液體，然后再反應4個小時即得到無色透明的深共融溶劑；

（2）待測溶液的制備

將瑪咖粉末按照1g:10mL料液比加入含30wt%水的深共融溶劑中，70℃下超聲波提取30min，離心后上清液即為提取液；將提取液溶解于甲醇中得到待測溶液，其中提取液的體積濃度為10%；

（3）對照品混合液的制備

分別精密稱取N-（間-甲氧基芐基）-亞麻酰胺、N-芐基亞麻酰胺、N-（間甲氧基芐基）-亞油酰胺、N-芐基亞油酰胺、N-芐基十六烷酰胺對照品，用甲醇分別溶解后混合，配制成多組對照品混合液，所述對照品混合液中各對照品的質量濃度介于0.5～2000μg/mL范圍內；

（4）標準曲線的建立

分別吸取步驟（3）中多組對照品混合溶液，進行液相色譜測定；

色譜條件如下：色譜柱為XtimateXB-C18色譜柱4.6×250mm，5μm；流動相：流動相A為水，流動相B為乙腈；梯度：0～24min，80vt%流動相B～100vt%流動相B；檢測器為G4212-60008二極管陣列檢測器，檢測波長210nm、280nm；流速0.8mL/min；柱溫40℃；進樣量10μL；

以步驟（3）中各對照品混合液的質量濃度為橫坐標，峰面積為縱坐標做標準曲線；

（5）待測溶液中瑪咖酰胺含量的測定

按步驟（4）的色譜條件對待測溶液進行測定，并利用標準曲線計算待測樣品中每種瑪咖酰胺的含量。

2.根據權利要求1一種使用深共融溶劑提取測定瑪咖中5種瑪咖酰胺的方法，其特征在于，步驟（4）中所述的多組對照品混合溶液中各對照品的濃度范圍分別為：N-（間-甲氧基芐基）-亞麻酰胺0.5～85μg/mL、N-芐基亞麻酰胺3～700μg/mL、N-（間甲氧基芐基）-亞油酰胺0.5～100μg/mL、N-芐基亞油酰胺4～2000μg/mL、N-芐基十六烷酰胺1～2000μg/mL。

3.根據權利要求1所述一種使用深共融溶劑提取測定瑪咖中5種瑪咖酰胺的方法，其特征在于，對N-（間甲氧基芐基）-亞麻酰胺的檢出限為2.57μg/mL。

4.根據權利要求1所述一種使用深共融溶劑提取測定瑪咖中5種瑪咖酰胺的方法，其特征在于，對N-芐基亞麻酰胺的檢出限為1.46μg/mL。

5.根據權利要求1所述一種使用深共融溶劑提取測定瑪咖中5種瑪咖酰胺的方法，其特征在于，對N-（間甲氧基芐基）-亞油酰胺的檢出限為2.06μg/mL。

6.根據權利要求1所述一種使用深共融溶劑提取測定瑪咖中5種瑪咖酰胺的方法，其特征在于，對N-芐基亞油酰胺的檢出限為1.64μg/mL。

7.根據權利要求1所述一種使用深共融溶劑提取測定瑪咖中5種瑪咖酰胺的方法，其特征在于，對N-芐基十六烷酰胺的檢出限為2.82μg/mL。