[發明專利]一種過表達PCNP基因的藥物的制備及用途有效
| 申請號： | 201710824523.1 | 申請日： | 2017-09-14 |
| 公開（公告）號： | CN107630027B | 公開（公告）日： | 2021-02-26 |
| 發明（設計）人： | 吳東棟;李濤;高熒苒;王大勇;陸丹;劉詩語;洪亞;魏建設;姬新穎 | 申請（專利權）人： | 吳東棟;李濤;高熒苒;王大勇;陸丹;劉詩語;洪亞;魏建設;姬新穎 |
| 主分類號： | C12N15/66 | 分類號： | C12N15/66;C12N15/85;C12N15/52;A61K48/00;A61P35/00 |
| 代理公司： | 暫無信息 | 代理人： | 暫無信息 |
| 地址： | 101111 北京市*** | 國省代碼： | 北京;11 |
| 權利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 表達 pcnp 基因 藥物 制備 用途 | ||
1.過表達PCNP基因的質粒在制備治療人神經母細胞瘤的藥物中的應用；
其中，所述過表達PCNP基因的質粒的構建方法包括以下步驟：
根據PCNP基因序列，設計引物，PCR擴增目的基因；
對GV230載體中的限制性酶切位點Xho I和Kpn I進行酶切，形成線性化GV230載體；
將目的基因與線性化GV230載體進行連接構建GV230-PCNP載體，即為過表達PCNP基因的質粒。
2.根據權利要求1所述的應用，其中，將所述過表達PCNP基因的質粒作為制備治療人神經母細胞瘤的藥物轉染入人神經母細胞瘤細胞中，然后加入遺傳霉素G418，培養獲得穩定轉染細胞株。
3.根據權利要求2所述的應用，其中，所述遺傳霉素G418的濃度為600μg/mL。
4.根據權利要求2所述的應用，其中，所述人神經母細胞瘤細胞包括人神經母細胞瘤細胞系SH-SY5Y和/或人神經母細胞瘤細胞系SK-N-SH。
5.根據權利要求1所述的應用，其中，PCR擴增目的基因的引物序列為：
正向引物：
5’-TACCGGACTCAGATCTCGAGCGCCACCATGGCGGACGGGAAGGCGGGAGAC-3’
反向引物：
5’-GATCCCGGGCCCGCGGTACCGTATTGTCTTGGTCATGGACATTTC-3’。
6.根據權利要求1所述的應用，其中，所述GV230載體的載體順序為CMV-MCS-EGFP-SV40-Neomycin。
7.根據權利要求1所述的應用，其中，對構建的GV230-PCNP載體還包括對PCNP基因進行正確性鑒定，其步驟如下：
對GV230-PCNP載體設計引物，擴增PCNP基因，進行瓊脂糖凝膠電泳PCR鑒定；
陽性克隆測序，鑒定GV230-PCNP載體中PCNP基因的正確性。
8.根據權利要求1所述的應用，其中，對GV230-PCNP載體設計引物的引物序列為：
正向引物：5’-CGCAAATGGGCGGTAGGCGTG-3’；
反向引物：5’-CGTCGCCGTCCAGCTCGACCAG-3’。
該專利技術資料僅供研究查看技術是否侵權等信息，商用須獲得專利權人授權。該專利全部權利屬于吳東棟;李濤;高熒苒;王大勇;陸丹;劉詩語;洪亞;魏建設;姬新穎，未經吳東棟;李濤;高熒苒;王大勇;陸丹;劉詩語;洪亞;魏建設;姬新穎許可，擅自商用是侵權行為。如果您想購買此專利、獲得商業授權和技術合作，請聯系【客服】
本文鏈接：http://www.szxzyx.cn/pat/books/201710824523.1/1.html，轉載請聲明來源鉆瓜專利網。
- 上一篇：流表項的匹配方法及裝置、計算機可讀存儲介質
- 下一篇：制冷裝置及其控制方法
