[發明專利]牛A型產氣莢膜梭菌的亞單位疫苗及其制備方法和應用有效
| 申請號： | 201710819084.5 | 申請日： | 2017-09-12 |
| 公開（公告）號： | CN107596361B | 公開（公告）日： | 2020-08-14 |
| 發明（設計）人： | 錢泓;吳有強;張強;王娟;白志軍;查銀河 | 申請（專利權）人： | 浙江海隆生物科技有限公司 |
| 主分類號： | A61K39/08 | 分類號： | A61K39/08;A61P31/04;C07K14/33;C12N15/70 |
| 代理公司： | 北京乾誠五洲知識產權代理有限責任公司 11042 | 代理人： | 付曉青;李廣文 |
| 地址： | 312000 浙江省紹興市*** | 國省代碼： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 型產氣 莢膜 單位 疫苗 及其 制備 方法 應用 | ||
1.一種牛A型產氣莢膜梭菌的亞單位疫苗，其特征在于，所述亞單位疫苗包括牛A型產氣莢膜梭菌的α-毒素蛋白截短體以及藥學上可以接受的佐劑，所述α-毒素蛋白截短體為α-毒素蛋白的從氨基酸255位到氨基酸372位的抗原決定簇氨基酸序列，所述α-毒素蛋白截短體的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示。
2.根據權利要求1所述的亞單位疫苗，其特征在于，所述藥學上可以接受的佐劑為ISA201VG佐劑，所述α-毒素蛋白截短體與佐劑的重量比為1:1。
3.根據權利要求1所述的亞單位疫苗，其特征在于，所述亞單位疫苗中每頭份含有30～200μg所述α-毒素蛋白截短體。
4.根據權利要求3所述的亞單位疫苗，其特征在于，所述亞單位疫苗中每頭份含有100μg所述α-毒素蛋白截短體。
5.一種制備如權利要求1-4任一權利要求中所述α-毒素蛋白截短體的方法，其特征在于，所述方法包括以下步驟：
1)將α-毒素蛋白的核苷酸序列進行密碼子優化得到密碼子優化后的α毒素蛋白核苷酸序列，將密碼子優化后的α毒素蛋白核苷酸序列通過PCR擴增出α-毒素蛋白截短體的核苷酸序列；
2)將所述α-毒素蛋白截短體的核苷酸序列插入到pET28a載體中，得到重組載體；以及
3)將重組載體轉入轉化E.coliBL21(DE3)，誘導表達、純化后獲得α-毒素蛋白截短體。
6.根據權利要求5所述的方法，其特征在于，所述密碼子優化后PCR擴增出的α-毒素蛋白截短體的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。
7.一種如權利要求1～4任一權利要求所述亞單位疫苗在制備用于治療和預防牛A型產氣莢膜梭菌的疫苗中的應用。
8.一種如權利要求1～4任一權利要求中所述α-毒素蛋白截短體在牛A型產氣莢膜梭菌亞單位疫苗的制備中的應用。
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