[發明專利]用于降解煙葉中纖維素的XC-19-1菌株及其應用

有效

• 申請號: 201710817213.7
• 申請日: 2017-09-12
• 公開（公告）號: CN107488613B
• 公開（公告）日: 2020-09-29
• 發明（設計）人: 楊宗燦;劉向真;馮穎杰;許衡;李家美;楊永鋒;彭玉富;張耀廣
• 申請（專利權）人: 河南中煙工業有限責任公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A24B15/20;C12R1/125
• 代理公司: 鄭州聯科專利事務所(普通合伙) 41104
• 代理人: 時立新

1.一株用于降解煙葉中纖維素的XC-19-1菌株，其特征在于，該菌株屬芽孢桿菌屬Bacillus，保藏名稱為：枯草芽孢桿菌 XC-19-1，分類學名稱為Bacillus subtilis XC-19-1，已于2017年6月19日保藏于武漢中國典型培養物保藏中心（CCTCC），保藏編號為CCTCCNO：M 2017351。

2.利用權利要求1所述用于降解煙葉中纖維素的XC-19-1菌株所制備的菌劑，其特征在于，通過如下步驟制備而成：

（1）活化菌種，將XC-19-1菌株置于初篩固體培養基上，活化培養；

（2）制備種子液，挑取步驟（1）中所培養的菌落，接種于液體種子培養基中，搖床培養；

（3）擴大培養，將步驟（2）中種子液轉接液體復篩培養基，培養至OD₆₀₀=1.8~2.0；

（4）制備菌劑，將步驟（3）中發酵液離心，棄上清，然后加入無菌水進行懸浮，調整活菌數為（9~10）×10⁷個/mL。

3.如權利要求2所述利用XC-19-1菌株所制備的菌劑，其特征在于，以g/L計，

所述初篩固體培養基組成為：羧甲基纖維素鈉 10.0，蛋白胨10.0，酵母粉5.0，KH₂PO₄1.0 ，MgSO₄?7H₂O 0.2，C₆H₁₄O₆ 2.0，NaCl 10.0，瓊脂20.0；

液體種子培養基組成為：羧甲基纖維素鈉10.0，蛋白胨10.0，酵母粉5.0，KH₂PO₄ 1.0，MgSO4?7H₂O 0.2，C₆H₁₄O₆ 2.0，NaCl 10.0；

液體復篩培養基組成為：麩皮汁50.0 mL/L，玉米粉10.0，牛肉膏3.0，蛋白胨2.0，NaCl5.0，KH₂PO₄ 1.0，K₂HPO₄ 1.0，MgSO₄?7H₂O 0.5。

4.權利要求2所述利用XC-19-1菌株所制備的 菌劑在煙葉中的應用，其特征在于，用于降解煙葉中纖維素。

5.如權利要求4所述利用XC-19-1菌株所制備的 菌劑在煙葉中的應用，其特征在于，按煙葉質量的1~3%比例，將制備好的菌劑均勻噴灑于煙葉表面，在溫度35℃~40℃、60%~80%濕度條件下，發酵處理48 h ~72 h，發酵完成后，再將煙葉加熱處理使細菌及其產生的纖維素酶失活即可。

6.如權利要求5所述利用XC-19-1菌株所制備的 菌劑在煙葉中的應用，其特征在于，將制備好的菌劑均勻噴灑于煙葉表面后，在37℃、75%濕度條件下，處理60h。