[發(fā)明專利]一種研究復(fù)方血栓通制劑各藥材組分藥效關(guān)系的方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201710817115.3
• 申請(qǐng)日: 2017-09-11
• 公開（公告）號(hào): CN107742058A
• 公開（公告）日: 2018-02-27
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 姚宏亮;劉宏;蘇薇薇;李沛波;吳忠;王永剛;彭維
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中山大學(xué)
• 主分類號(hào): G06F19/00
• 分類號(hào): G06F19/00
• 代理公司: 廣州番禺容大專利代理事務(wù)所(普通合伙)44326
• 代理人: 劉新年,黃開艷

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種研究復(fù)方中藥處方各味藥材藥效關(guān)系的方法

背景技術(shù)

復(fù)方中藥是由幾味中藥按照“君臣佐使”的規(guī)律及合適的劑量配伍而成，往往具有較低的劑量閾和較寬的治療窗，很好地體現(xiàn)了中醫(yī)防病治病的臨床特色。復(fù)方中藥制劑中的藥材少則五六味，多則二十余味，其功效的發(fā)揮并不是單味藥材藥效的簡(jiǎn)單相加。近年來，計(jì)算機(jī)數(shù)據(jù)挖掘技術(shù)逐步在中醫(yī)組方規(guī)律解析方面得到廣泛應(yīng)用，由中國中醫(yī)科學(xué)院中藥研究所與中國科學(xué)院自動(dòng)化研究所聯(lián)合研發(fā)的中醫(yī)傳承輔助系統(tǒng)，在探討古方、驗(yàn)方、民族藥病因病機(jī)、配伍機(jī)制、臨床分析方面，提供了重要的科學(xué)依據(jù)。然而，單純的數(shù)據(jù)挖掘技術(shù)是建立在醫(yī)案經(jīng)驗(yàn)、古籍或現(xiàn)代參考文獻(xiàn)的基礎(chǔ)之上，對(duì)復(fù)方中藥組方的科學(xué)解析仍缺乏強(qiáng)有力的數(shù)據(jù)驗(yàn)證與實(shí)驗(yàn)支撐。

復(fù)方血栓通制劑由中山大學(xué)眼科中心與廣東眾生藥業(yè)股份有限公司共同研制而成，具有活血化瘀，益氣養(yǎng)陰的功效，該處方由三七、丹參、黃芪、玄參組成，方中在活血化瘀藥材的基礎(chǔ)上，配以黃芪、玄參等補(bǔ)氣、滋陰的藥材，具有鮮明的中醫(yī)南派用藥特色，臨床上用于血瘀兼氣陰兩虛證的視網(wǎng)膜靜脈阻塞及穩(wěn)定性勞累型心絞痛。從1996年批準(zhǔn)上市至今，長(zhǎng)期、大量的醫(yī)療實(shí)踐和臨床應(yīng)用證實(shí)，復(fù)方血栓通制劑對(duì)眼底及心腦血管疾病療效顯著，被列為醫(yī)保甲類藥品(2009年)、國家基本藥物目錄(2012年版)，銷往全國各地4000多家醫(yī)院。然而，目前復(fù)方血栓通制劑中各味藥材的藥效貢獻(xiàn)、主次及相互作用關(guān)系仍不明確，其組方內(nèi)涵仍缺乏現(xiàn)代科學(xué)數(shù)據(jù)支撐。為闡明其組方配伍規(guī)律，篩選最優(yōu)組方比例提供依據(jù)，構(gòu)建一種針對(duì)復(fù)方血栓通制劑的各味藥材藥效關(guān)系的研究方法，對(duì)該制劑乃至復(fù)方中藥的現(xiàn)代化研究具有積極意義。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明公開了一種研究復(fù)方血栓通制劑處方各味藥材藥效關(guān)系的方法。

本發(fā)明采用的技術(shù)方案包括如下步驟：

1、制備差異樣品及藥材缺失樣品：在復(fù)方血栓通制劑處方配比的約束下，以三七、丹參、黃芪、玄參的質(zhì)量百分含量為因素，采用四因素十一水平的均勻設(shè)計(jì)方法制備具有藥材不同投料比的11份差異樣品；并同時(shí)制備三七單味藥材樣品、三七與丹參兩味藥材樣品、三七與丹參與黃芪三味藥材樣品、丹參與黃芪與玄參三味藥材樣品、黃芪與玄參兩味藥材樣品共5份藥材缺失樣品；所述11份差異樣品及5份藥材缺失樣品均制浸膏備用；

2、構(gòu)建急性氣滯血瘀動(dòng)物模型，針對(duì)如上16種樣品進(jìn)行相應(yīng)的藥效實(shí)驗(yàn)；

3、綜合運(yùn)用多種統(tǒng)計(jì)方法分析差異樣品及藥材缺失樣品中各味藥材與藥效間的相關(guān)關(guān)系。

步驟2所述的急性氣滯血瘀動(dòng)物模型的構(gòu)建方法為：取SPF級(jí)SD大鼠，皮下注射腎上腺素0.8mg/kg，2h后置于0-4℃冰水中浸泡5min，2h后再次注射同劑量腎上腺素0.8 mg/kg，禁食不禁水12-16h，于次晨取血、取組織進(jìn)行生化指標(biāo)檢測(cè)。

所述的藥效實(shí)驗(yàn)選擇的藥效指標(biāo)包括血紅蛋白含量HGB、紅細(xì)胞壓積HCT、紅細(xì)胞分布寬度RDW、α-羥丁酸脫氫酶α-HBDH、乳酸脫氫酶LDH、谷草轉(zhuǎn)氨酶AST、谷丙轉(zhuǎn)氨酶 ALT、堿性磷酸酶ALP、二氧化碳結(jié)合力CDCP、肌酐Cr、尿酸UA、血清鉀SK、總抗氧化能力T-AOC、丙二醛MDA、高敏C反應(yīng)蛋白hs-CRP、白介素IL-6、腫瘤壞死因子TNF-α、補(bǔ)體C3、免疫球蛋白IgM、血小板活化因子PAF共20種。

所述的統(tǒng)計(jì)方法具體為：采用灰關(guān)聯(lián)、皮爾遜相關(guān)、偏相關(guān)方法計(jì)算各味藥材與藥效指標(biāo)間的關(guān)聯(lián)性，闡明其藥效貢獻(xiàn)及主次關(guān)系；采用多元線性回歸、偏最小二乘法計(jì)算各味藥材對(duì)相應(yīng)藥效指標(biāo)的權(quán)重；采用主成分分析、最優(yōu)尺度分析計(jì)算各味藥材與全部藥效指標(biāo)的象限分布，闡明其相互影響；采用析因設(shè)計(jì)試驗(yàn)方法計(jì)算各味藥材之間與對(duì)應(yīng)藥效指標(biāo)的交互效應(yīng)，闡明其相互之間的協(xié)同、拮抗作用。上述統(tǒng)計(jì)方法可運(yùn)用SPSS 21.0中的相應(yīng)模塊實(shí)現(xiàn)，置信區(qū)間為95％。

所述的析因設(shè)計(jì)試驗(yàn)方法具體為：針對(duì)權(quán)利要求3所述20個(gè)藥效指標(biāo)，每個(gè)指標(biāo)均采用二因素二水平2×2析因設(shè)計(jì)，試驗(yàn)中二因素包括三七與丹參，三七與黃芪、玄參，三七與丹參、黃芪、玄參，三七、丹參與黃芪、玄參，黃芪與玄參共5組，每個(gè)因素設(shè)置有、無2個(gè)水平。