[發明專利]一種柿單寧-石墨烯-Pt復合材料修飾絲網印刷電極檢測過氧化氫的方法

有效

• 申請號: 201710814815.7
• 申請日: 2017-09-12
• 公開（公告）號: CN107607597B
• 公開（公告）日: 2019-11-26
• 發明（設計）人: 李桂銀;薛葉薇;李珊珊;黃勇;梁晉濤;王志宏;董辰楊;周治德
• 申請（專利權）人: 桂林電子科技大學
• 主分類號: G01N27/26
• 分類號: G01N27/26;G01N27/30
• 代理公司: 45112 桂林市華杰專利商標事務所有限責任公司
• 代理人: 羅玉榮<國際申請>=<國際公布>=<進入

本發明公開了一種柿單寧?石墨烯?Pt復合材料修飾絲網印刷電極檢測過氧化氫的方法，首先，以柿單寧為原料，利用一步還原法直接制備了柿單寧?石墨烯?Pt納米復合材料，而后采用電沉積技術在絲網印刷電極表面沉積納米金，通過靜電吸附作用將滴在電極表面的柿單寧?石墨烯?Pt復合材料吸附到絲網印刷電極表面，利用柿單寧對金屬離子的吸附和石墨烯大的比表面積以及納米Pt的高效催化協同增強對H₂O₂的催化，構建H₂O₂無酶傳感器，采用電流?時間法進行H₂O₂的計時電流響應檢測。根據傳感器的電流響應與H₂O₂濃度的關系繪制出工作曲線，實現對H₂O₂的定量檢測。本發明具有良好的穩定性、特異性高，且操作簡單方便快速。

技術領域

本發明屬于生物檢測技術領域，具體涉及一種復合材料修飾絲網印刷電極檢測過氧化氫的方法。

背景技術

檢測出細胞內過氧化氫（H₂O₂）的含量及其動態釋放過程可以闡明信號轉導途徑的機理，對于細胞衰老病，細胞凋亡變有更深的了解，有利于擴大其在臨床病理診斷中的應用。目前用于檢測H₂O₂的技術主要有分光光度法、比色法、熒光法、色譜法、化學法等。公開號為CN105692719A的發明專利，公開了一種通過硫化鈷納米材料用比色法檢測過氧化氫的，將硫化鈷的磷酸鹽緩沖液加入Tirs-HCl 緩沖溶液中，然后加入待檢測的溶液、TMB顯色劑，通過觀察顏色反應從而判斷待檢測的溶液是否含有過氧化氫。公開號為CN102654475A的發明專利，公開了一種序列特異的多肽對辣根過氧化物酶的定向結合及其對該酶活性的促進作用，利用電化學檢測方法檢測過氧化氫。公開號為CN106404873A的發明專利，公開了一種合成二氧化硅-三維石墨烯復合材料用于檢測過氧化氫。這些方法有的是酶對環境的要求較高容易失去活性且導電性不好，或者方法操作步驟多，價格昂貴，或者是費時且技術要求高等缺點，需要建立一種快速、靈敏、操作簡單的過氧化氫檢測方法。本發明采用的是利用簡單還原方法制備柿單寧-石墨烯-Pt復合材料對絲網印刷電極進行修飾檢測過氧化氫，并且所使用的絲網印刷碳電極體積小，便于攜帶，易于實現微型化，對于發展快速簡便、價廉、檢測限低、便攜化的醫學檢測，具有廣闊的應用前景。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是提供一種利用柿單寧-石墨烯-Pt復合材料修飾絲網印刷電極用電化學方法檢測H₂O₂的方法，以解決目前的酶生物傳感器的易受環境影響和導電性不好、技術要求高等問題。

本發明的檢測原理為：利用柿單寧對金屬離子的吸附和石墨烯大的比表面積以及Pt NPs的高效催化協同增強對H₂O₂的催化作用，采取電流-時間法對H₂O₂進行檢測，根據傳感器的電流響應與H₂O₂濃度的關系繪制出工作曲線，實現對H₂O₂的檢測。本發明所采用的技術方案是按照以下步驟進行：

步驟1：還原氧化石墨烯的制備

稱取氧化石墨烯（GO）粉末置于超純水中，制成氧化石墨烯溶液后加入抗壞血酸，攪拌后離心去上清液，干燥后所得固體即為還原氧化石墨烯(RGO)。

步驟2：柿單寧-石墨烯-Pt納米復合材料的制備

（1）制備柿單寧-石墨烯復合材料：取步驟1石墨烯溶液10mL，加入20mg柿單寧（PT）超聲制成RGO-PT懸浮液。

（2）柿單寧-石墨烯-Pt復合納米材料的制備：在（1）制成的溶液中加入的氯鉑酸溶液和抗壞血酸，于室溫下攪拌20h，快速攪拌，緩慢加入。