[發明專利]復方中藥具有化學成分含量差異的樣品構建方法

在審

• 申請號: 201710814163.7
• 申請日: 2017-09-11
• 公開（公告）號: CN107764911A
• 公開（公告）日: 2018-03-06
• 發明（設計）人: 姚宏亮;劉宏;蘇薇薇;李沛波;吳忠;王永剛;彭維
• 申請（專利權）人: 中山大學
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 廣州番禺容大專利代理事務所(普通合伙)44326
• 代理人: 劉新年,黃開艷

1.復方中藥具有化學成分含量差異的樣品構建方法，所述的構建方法包括以下步驟：

(1)以復方中藥各味藥材單獨作為試驗因素；

(2)根據復方中藥處方比例確定各味藥材的投料量變化范圍為：非君藥組份的變化范圍為0％至其處方含量的2倍，君藥藥材的變化范圍為100％減去非君藥組份含量之和；并在該范圍內確定合適的水平數；

(3)采用均勻設計方法，對各組份及其投料量均勻排布；按照標準工藝流程制備多組差異樣品；

(4)制作各組差異樣品的指紋圖譜，采用聚類分析方法驗證差異樣品間的差異性。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：步驟(1)中試驗因素數為復方中藥的各味藥材份數。

3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：步驟(2)中試驗水平數確定為9-11水平。

4.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：步驟(4)的具體方法為，根據復方中藥的標準工藝流程制備多份差異樣品，分別制作其指紋圖譜，采用聚類分析方法分析各樣品的色譜峰峰面積間的差異性。

5.根據權利要求1到4所述的方法，其特征在于：所述的復方中藥的組份為3到6份。

6.復方血栓通制劑具有化學成分含量差異的樣品構建及檢測方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)、差異樣品投料量：丹參在0％-20％間均勻變化，黃芪在0％-36％間均勻變化，玄參在0％-36％間均勻變化，君藥三七在33.2％-74.8％間均勻變化，根據四因素十一水平均勻設計表得十一個差異樣品投料量；

(2)根據《中華人民共和國藥典》2015年版復方血栓通膠囊標準工藝流程，按步驟(1)差異樣品投料量投料制備差異樣品；

(3)對步驟(2)所述制備差異樣品制作指紋圖譜，所述制作指紋圖譜的液相色譜條件為：以乙腈為流動相A，0.05％磷酸溶液為流動相B；流動相A的梯度洗脫變化為：0-50min，15％→34％；流動相B梯度洗脫變化為50-59min，34％→75％；流速1.0mL/min，柱溫25℃，檢測波長203nm、270nm；

(4)采用聚類分析方法分析步驟(2)各樣品的色譜峰峰面積間的差異性。

7.腦栓通膠囊具有化學成分含量差異的樣品構建及檢測方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)差異樣品投料量：赤芍在0％-48％間均勻變化，郁金在0％-38％間均勻變化，天麻在0％-20％間均勻變化，漏蘆在0％-28％之間變化，君藥蒲黃在18.5％-47.5％間均勻變化，根據五因素九水平均勻設計表得九個差異樣品投料量；

(2)根據《中華人民共和國藥典》2015年版腦栓通膠囊標準工藝流程，按步驟(1)差異樣品投料量投料制備差異樣品；

(3)對步驟(2)所述制備差異樣品制作指紋圖譜，所述制作指紋圖譜的液相色譜條件為：以乙腈為流動相A，四氫呋喃為流動相B，0.05％磷酸溶液為流動相C；梯度洗脫變化：流動相A為0-70min，2％→20％，流動相B為0-70min，0％→10％，流動相C為0-70min，98％→70％；流速1.1mL/min，柱溫20℃，檢測波長254nm、275nm；

(4)采用聚類分析方法分析步驟(2)各樣品的色譜峰峰面積間的差異性。

8.口炎清顆粒具有化學成分含量差異的樣品構建及檢測方法，包括以下步驟：

(1)差異樣品投料量：玄參在0％-42％間均勻變化，天冬在0％-42％間均勻變化，麥冬在0％-42％間均勻變化，甘草在0％-22％之間變化，君藥山銀花在16％-36％之間均勻變化；根據五因素十一水平均勻設計表得十一個差異樣品投料量；

(2)根據《中華人民共和國藥典》2015年版口炎清顆粒標準工藝流程，按步驟(1)差異樣品投料量投料制備差異樣品；

(3)對步驟(2)所述制備差異樣品制作指紋圖譜，所述制作指紋圖譜的液相色譜條件為：流動相A為0.1％甲酸乙腈溶液，梯度變化為0-10min，2％→10％；10-85min，10％→50％；85-115min，50％→100％；流動相B為0.1％甲酸水溶液,梯度變化為0-10min，98％→90％；10-85min，90％→50％；85-115min，50％→0％，流速0.3mL/min，柱溫40℃；

(4)采用聚類分析方法分析步驟(2)各樣品的色譜峰峰面積間的差異性。