[發明專利]一種利用干細胞提取物和中藥提取物混合制備的深度皮膚再生劑及其制備方法和應用

有效

• 申請號: 201710814046.0
• 申請日: 2017-09-11
• 公開（公告）號: CN107468866B
• 公開（公告）日: 2020-10-16
• 發明（設計）人: 童強;汪佳祺
• 申請（專利權）人: 上海亞睿生物科技有限公司
• 主分類號: A61K36/896
• 分類號: A61K36/896;A61K36/886;A61P17/02;A61P3/10;A61K35/28
• 代理公司: 上海卓陽知識產權代理事務所(普通合伙) 31262
• 代理人: 周春洪

1.一種利用干細胞提取物和中藥提取物混合制備的深度皮膚再生劑，其特征在于，所述的深度皮膚再生劑的制備方法包括以下步驟：

(1)干細胞提取物的制備：將華通氏塊碎塊用含膠原酶II的DMEM培養基消化，過濾后使用含10％胎牛血清FBS的DMEM培養基傳代培養，再換用無血清DMEM培養基傳代培養，2天傳代一次，收集傳代3-5代的細胞進行后續處理；用含EDTA的DMEM培養基消化細胞，并用PBS溶液清洗，再用無血清DMEM培養基重懸，超聲波裂解破碎細胞，破碎產物離心后取上清；將上清用孔徑為5000埃的濾器過濾；

(2)中藥提取物的制備：按重量份稱取充分干燥的物料：藍蓮花18-25份、玫瑰花8-12份、木槿花6-10份、蘆薈6-10份、黃芪2-4份、甘草1-3份，加水磨碎靜置；煮沸蒸餾，收集蒸餾液，離心取水相，按1:1-3的比例加入乙醇，充分混勻后離心取上清，用負壓離心機進行濃縮，至總黃酮含量不小于20mg/L；

(3)深度皮膚再生劑的制備：將干細胞提取物和中藥提取物混合。

2.根據權利要求1所述的深度皮膚再生劑，其特征在于，步驟(1)中所述的EDTA濃度為0.04-0.06M。

3.根據權利要求1所述的深度皮膚再生劑，其特征在于，步驟(1)中所述的超聲波裂解破碎細胞，其具體參數是100-150W，10-20S*15-25次，10-20S間隔。

4.根據權利要求1所述的深度皮膚再生劑，其特征在于，步驟(1)中所述的用孔徑為5000埃的濾器過濾，具體是使用超濾管超濾提純和濃縮，時間為25-40min，壓力為0.25-0.35MPa。

5.根據權利要求1所述的深度皮膚再生劑，其特征在于，步驟(2)中各物料的組成為：藍蓮花21份、玫瑰花10份、木槿花8份、蘆薈8份、黃芪3份、甘草2份。

6.根據權利要求1所述的深度皮膚再生劑，其特征在于，步驟(2)中，所述的用負壓離心機進行濃縮，具體參數-20～-40mm Hg，40～50攝氏度。

7.根據權利要求1所述的深度皮膚再生劑，其特征在于，步驟(3)中，所述的中藥提取物和干細胞提取物的體積比為1:18-30。

8.權利要求1所述的深度皮膚再生劑的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)干細胞提取物的制備：將華通氏塊碎塊用含膠原酶II的DMEM培養基消化，過濾后使用含10％胎牛血清FBS的DMEM培養基傳代培養，再換用無血清DMEM培養基傳代培養，2天傳代一次，收集傳代3-5代的細胞進行后續處理；用含EDTA的DMEM培養基消化細胞，并用PBS溶液清洗，再用無血清DMEM培養基重懸，超聲波裂解破碎細胞，破碎產物離心后取上清；將上清用孔徑為5000埃的濾器過濾；

(2)中藥提取物的制備：按重量份稱取充分干燥的物料：藍蓮花18-25份、玫瑰花8-12份、木槿花6-10份、蘆薈6-10份、黃芪2-4份、甘草1-3份，加水磨碎靜置；煮沸蒸餾，收集蒸餾液，離心取水相，按1:1-3的比例加入乙醇，充分混勻后離心取上清，用負壓離心機進行濃縮，至總黃酮含量不小于20mg/L；

(3)深度皮膚再生劑的制備：將干細胞提取物和中藥提取物混合。

9.權利要求1所述的深度皮膚再生劑在制備促進深度皮膚再生的藥物中的應用。

10.權利要求1所述的深度皮膚再生劑在制備治療糖尿病足的藥物中的應用。