[發(fā)明專利]一種甜瓜單倍體的創(chuàng)制方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201710805270.3
• 申請(qǐng)日: 2017-09-08
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN107517850A
• 公開(kāi)（公告）日: 2017-12-29
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 戴照義;王運(yùn)強(qiáng);劉志雄;郭鳳領(lǐng);龔鈺
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 湖北省農(nóng)業(yè)科學(xué)院經(jīng)濟(jì)作物研究所
• 主分類號(hào): A01H4/00
• 分類號(hào): A01H4/00
• 代理公司: 武漢宇晨專利事務(wù)所42001
• 代理人: 龔瑩瑩

1.一種甜瓜單倍體的創(chuàng)制方法，包括下述步驟：

1）取清晨開(kāi)花前的甜瓜雄花，滅活；

2）用步驟1）中的雄花花粉對(duì)前一日套袋隔離、當(dāng)日開(kāi)放的雌花進(jìn)行授粉，授粉后繼續(xù)對(duì)雌花進(jìn)行套袋隔離；

3）在授粉后的第11或12天，摘下經(jīng)過(guò)授粉的子房，將表皮清洗干凈，在超凈工作臺(tái)上用酒精溶液浸泡后再用升汞溶液浸泡進(jìn)行消毒，無(wú)菌水沖洗后，用無(wú)菌紙吸干幼果表面水分，將幼果橫切成3-5mm的薄片，挑取幼胚，接種于MS培養(yǎng)基上；

4）在MS培養(yǎng)基上培養(yǎng)10-12天的幼胚，挑取轉(zhuǎn)為綠色的胚，轉(zhuǎn)到配方為MS+0.3-0.5mg/L6-BA+ 2.5%-3.5% Suc+0.6%-1.0% Agar+0.15mg/L 活性炭的誘導(dǎo)培養(yǎng)基上進(jìn)行誘導(dǎo)培養(yǎng)，至芽長(zhǎng)出；

5）取小植株的芽或葉片0.2-0.3 cm²，制備單細(xì)胞懸浮液，濃度為1.0×10⁵-1.0×10⁷個(gè)/mL，用流式細(xì)胞儀進(jìn)行檢測(cè)；

6）將檢測(cè)為單倍體的植株轉(zhuǎn)到配方為MS+0.3-0.5mg/L 6-BA+0.8-1.2mg/L NAA+3% Suc的生根培養(yǎng)基上誘導(dǎo)生根；

7）當(dāng)植株根系發(fā)育適宜時(shí)，開(kāi)始煉苗，先將三角瓶封口打開(kāi)，置于常溫下生長(zhǎng)2-3d，然后取出植株，洗凈根部培養(yǎng)基，放入三角瓶中，倒入清水生長(zhǎng)3-4d，再將植株移栽到裝有基質(zhì)的育苗缽，遮陰2-3天后，轉(zhuǎn)為正常管理。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：所述的甜瓜品種為白富康M288，所述的基質(zhì)包括:草炭：珍珠巖=1:1，體積比。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于：步驟3）中所述的酒精為75%體積比的酒精，浸泡時(shí)間為30-60s；所述的升汞溶液的濃度為0.1%，浸泡時(shí)間為8-10 min；無(wú)菌水沖洗3-5次。