[發明專利]一種用于血清中galectin-3濃度檢測的電化學傳感器制備方法

有效

• 申請號: 201710803421.1
• 申請日: 2017-09-06
• 公開（公告）號: CN107576702B
• 公開（公告）日: 2020-09-11
• 發明（設計）人: 于超;唐志勇;陳俊
• 申請（專利權）人: 重慶醫科大學
• 主分類號: G01N27/327
• 分類號: G01N27/327;G01N27/48;G01N33/543;B82Y15/00
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本發明涉及引發2型糖尿病的胰島素靈敏度降低早期診斷生物標志物?galectin?3(Gal?3)的血液濃度水平檢測的電化學傳感器的制備方法及應用，屬于電化學檢測技術領域。其特征在于：首先分別合成N?GNRs?Fe?MOFs@AuPNs傳感器基底修飾納米復合材料和AuPt?MB納米復合信號材料，再將能與Gal?3特異性結合檢測抗體與AuPt?MB復合材料混合，制得生物信號探針。然后在N?GNRs?Fe?MOFs@AuPNs復合材料修飾的基底平臺上接合Gal?3特異性捕獲抗體，以便于特異性捕獲目標物Gal?3。最后通過Gal?3與其檢測抗體和捕獲抗體的特異性結合，制備得到了Gal?3的血液濃度水平檢測的電化學傳感器，該傳感器成功的用于血清中Gal?3的檢測。本發明的優點在于靈敏度高，特異性強，檢測迅速，方便。本發明為引發2型糖尿病的胰島素抵抗提供早期的診斷依據。

技術領域：

本發明涉及引發2型糖尿病的胰島素靈敏度降低早期診斷生物標志物-galectin-3(Gal-3)的血液濃度水平檢測的電化學傳感器的制備方法及應用，尤其是基于AuPt-MB納米復合材料作為新型信號探針制備的夾心型免疫生物傳感器，用于血清中galectin-3(Gal-3)濃度檢測，屬于電化學檢測領域。

背景技術：

糖尿病在全球范圍內迅速增長，對人類健康已構成嚴重威脅。特別是由胰島素靈敏度降低引起的2型糖尿病(T2D)能夠導致致死性的心血管并發癥，并占據糖尿病患病率的90％。在最近的研究中發現，galectin-3(Gal-3)能直接與胰島素受體結合抑制下游胰島素受體(IR)信號傳導和鏈接炎癥降低胰島素敏感性，最終導致胰島素抵抗和葡萄糖不耐受，引發2型糖尿病。因此，監測血液中Gal-3濃度水平的變化，對預防T2D及其心血管并發癥尤為重要。

在目前對Gal-3進行檢測的主要傳統方法有：酶聯免疫吸附測定(ELISA)，免疫組化和“常規Gal-3”測定(雅培診斷)。然而，這些傳統方法相對存在著昂貴，費時，半定量，需要熟練的操作者，靈敏度有限和線性范圍窄等缺點的限制。特別是不能滿足早期檢測的臨床需求。因此，探索研究一種用于Gal-3的簡便，快速和靈敏的檢測方法顯得格外重要。與傳統的檢測方法相比，電化學免疫傳生物感器檢測方法因其具有靈敏度高，特異性強和快速檢測等優點，近年來在臨床蛋白生物標志物檢測方面越來越受到重視。同時，基于納米材料的電化學生物傳感器由于簡便，快速，成本低，靈敏度高等優勢而被廣泛應用于生物樣品的檢測。因此，基于納米復合材料構建一種夾心式電化學免疫生物傳感器為實現血清中Gal-3的低濃度高靈敏檢測提供了一種新思路。

亞甲基藍(MB)是一種吩噻嗪染料的衍生物，由于其結構中存在富含電子的硫和氮雜原子作為一種新興的電化學氧化還原活性物質被廣泛用地應用于催化、感測和氧化還原指示等領域。然而，由于其不均勻的形態使其在免疫傳感器信號探針方面的應用收到限制。為解決這一問題，本發明創新性地引入了具有比表面積大、導電性強和生物分子兼容性好AuPt雙金屬納米材料與MB發生氧化聚合反應，得到了具有均勻棒狀形態AuPt-MB納米復合材料，并且顯示出顯著的電化學活性。在本發明中將AuPt-MB納米復合材料與Gal-3特異性檢測抗體Ab2結合，并用BSA做封閉劑制備得到新型納米信號探針。