[發明專利]一種基于介孔石墨相氮化碳的抗腫瘤藥物載體的制備方法及應用

在審

• 申請號: 201710796845.X
• 申請日: 2017-09-06
• 公開（公告）號: CN107496920A
• 公開（公告）日: 2017-12-22
• 發明（設計）人: 王蕾;趙洪娟;李麗;郝永偉;牛夢亞;鄭翠霞;胡玉潔;宋慶齡;牛秀秀;張振中
• 申請（專利權）人: 鄭州大學
• 主分類號: A61K41/00
• 分類號: A61K41/00;A61K47/04;A61K47/36;A61K45/06;A61P35/00
• 代理公司: 鄭州天陽專利事務所(普通合伙)41113
• 代理人: 聶孟民

1.一種基于介孔石墨相氮化碳的抗腫瘤藥物載體的制備方法，其特征在于，于玻璃容器中加入硅溶膠HS-40和單氰胺，室溫攪拌兩個小時使其充分混合均勻，于油浴中攪拌12h，以去除水分；產物研磨后，引入硬模板孔道中，置于加蓋的坩堝內，在550℃以上高溫電阻爐中煅燒3-4h，冷卻至室溫，研碎至粉末，加入到NH₄HF₂溶液中，過濾，水洗5次，再加入超純水攪拌，過濾，水洗5次，用乙醇沖洗，冷凍干燥，得黃色產物介孔石墨相氮化碳mpg-C₃N₄；然后與抗腫瘤藥物攪拌均勻，超聲并旋蒸至去除溶劑，包裹上活化的透明質酸，得基于介孔石墨相氮化碳的抗腫瘤藥物載體；

所述的抗腫瘤藥物為血卟啉單甲醚、吲哚菁綠，二氫卟吩，阿霉素，多西紫杉醇等藥物中的一種或幾種；

所述的NH₄HF₂溶液是NH₄HF₂晶體溶于水中制成，濃度為4mol/L；

所述活化的透明質酸是，取透明質酸20-30mg加入超純水20-30mL中，攪拌溶解均勻，再加入200-250mg的1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽和100-150mg的N-羥基琥珀酰亞胺攪拌20-30min，即成活化的透明質酸。

2.根據權利要求1所述的基于介孔石墨相氮化碳的抗腫瘤藥物載體的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

一、制備介孔石墨相氮化碳，采用硬質模板法制備介孔石墨相氮化碳，方法是：

(1)于玻璃容器中加入16-20g LUDOX HS-40和4-5g單氰胺，加水至100mL，室溫攪拌2h，充分混合均勻，成水溶液；

(2)將水溶液置于50-60℃油浴中攪拌12-24h，以去除水分，得干物，干物

(3)將干物研磨成粉，引入硬模板孔道中，置于加蓋的坩堝內，在高溫電阻爐中以2.5℃/min的速率升溫至550℃，保溫煅燒3-4h；

(4)冷卻至室溫，再用研缽研碎至粉末狀，加入濃度為4mol/L的氟化氫銨溶液200-250mL中，攪拌2d，去除模板，過濾，用水沖洗5次；

(5)再加入200mL超純水攪拌1d，過濾，500ml水洗5次；

(6)用乙醇沖洗3次，冷凍干燥，得黃色的介孔石墨相氮化碳；

二、制備透明質酸修飾的介孔石墨相氮化碳，方法是：

于冰浴中向活化的透明質酸溶液中加入濃度3mg/mL的10-15mL介孔石墨相氮化碳溶液，室溫反應2-4h；在12000r/min離心15min，去除多余的透明質酸，沉淀物用水復溶，裝入MW 8-14KDa的透析袋透析2d，透析液冷凍干燥即得透明質酸修飾的介孔石墨相氮化碳；

三、制備透明質酸修飾的介孔石墨相氮化碳載藥血卟啉單甲醚，方法是：

(1) 介孔石墨相氮化碳載藥血卟啉單甲醚的制備：

將血卟啉單甲醚與介孔石墨相氮化碳按質量比1-3:1混合在一起，溶解于質量濃度50%的乙醇水溶液中，室溫超聲2-4h，旋蒸，除去溶劑，得棕紅色產物，將產物用水復溶，12000r/min離心5min，除去上層的上清液，得下層的介孔石墨相氮化碳載藥血卟啉單甲醚；

(2) 制備活化透明質酸修飾的介孔石墨相氮化碳載藥血卟啉單甲醚：

于冰浴中向活化的透明質酸溶液中加入制得的介孔石墨相氮化碳載藥血卟啉單甲醚，室溫反應2-4h，然后12000r/min離心15min，沉淀物用水復溶，裝入MW 8-14KDa透析袋透析2d；透析液冷凍干燥，即得透明質酸修飾的介孔石墨相氮化碳載藥血卟啉單甲醚；

四、制備活化的透明質酸修飾的介孔石墨相氮化碳載藥血卟啉單甲醚過氧化氫酶：

將2.50mg 過氧化氫酶溶解于pH7的PBS溶液中，加入介孔石墨相氮化碳載藥血卟啉單甲醚2.50mg，超聲2-4h，然后旋蒸至溶劑全無，置于活化的透明質酸溶液中，室溫反應2-4h，12000r/min離心15min，得沉淀物，沉淀物用水復溶，裝入MW 8-14KDa透析袋透析2d，透析液冷凍干燥，得透明質酸包衣的棕紅色產物即為基于介孔石墨相氮化碳的抗腫瘤藥物載體。